丹酚酸F调控BaxCaspase-3GSDME信号通路改善肾小管上皮细胞焦亡作用机制_NormalPdf.docxVIP

第30卷第

第30卷第9期2024年5月

Vol.30，No.9May，2024

ChineseJournalofExperimentalTraditionalMedicalFormulae

丹酚酸F调控Bax/Caspase-3/GSDME信号通路改善肾小管上皮细胞焦亡作用机制

石贤聪，谢治深，赵靓，王佳俊，段亚飞，王潘，张振强，张效威*，徐江雁*

（河南中医药大学中医药科学院，郑州450046）

［摘要］目的：基于B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）相关X蛋白（Bax）/胱天蛋白酶-3（Caspase-3）/消皮素E（GSDME）通路探讨丹酚酸F改善高糖诱导的肾小管上皮细胞（HK-2）损伤的机制。方法：细胞增殖与活性检测（CCK-8）法检测不同浓度（2.5、5、10、20μmol·L-1）丹酚酸F对高糖诱导的HK-2细胞相对活力的影响及给予丹酚酸F不同干预时间条件下HK-2细胞的相对活力；乳酸脱氢酶（LDH）试剂盒和酶联免疫吸附测定法（ELISA）试剂盒分别检测细胞培养基上清中LDH和白细胞介素-1β（IL-1β)的含量；流式细胞术结合异硫氰酸荧光素（AnnexinV-FITC）/碘化丙啶（PI）和Hoechst33342/PI染色检测丹酚酸F对高糖诱导的HK-2细胞PI阳性率的影响；蛋白免疫印迹法（Westernblot）评价丹酚酸F对高糖诱导的HK-2细胞中Bax、Bcl-2、细胞色素C（CytC）、胱天蛋白酶-9（Caspase-9）、Caspase-3、GSDME蛋白表达及激活情况的影响。2，7-二氯二氢荧光素二乙酸酯荧光探针法（DCFH-DA）及线粒体膜电位（JC-1）考察丹酚酸F对高糖诱导的HK-2细胞中活性氧（ROS）产生及线粒体膜电位的影响。结果：与空白组比较，模型组细胞活力显著降低（P0.01），乳酸脱氢酶、炎症因子IL-1β、PI阳性细胞比例均显著升高（P0.01）；Bax、CytC、Caspase-9、Caspase-3、GSDME蛋白表达显著升高（P0.01），Bcl-2蛋白表达显著降低（P0.01），HK-2细胞线粒体膜电位的降低，ROS产生过量蓄积。与模型组比较，丹酚酸F组有效改善高糖诱导所致HK-2细胞的损伤（P0.05），明显降低细胞培养基上清中LDH及IL-1β含量（P0.05，P0.01），显著减少PI阳性细胞的比例（P0.01）；丹酚酸F组降低Bax、CytC、Caspase-9、Caspase-3、GSDME蛋白表达，明显升高Bcl-2蛋白表达（P0.05，P0.01），HK-2细胞线粒体膜电位的升高，ROS的过量蓄积减少。结论：丹酚酸F通过减少ROS的产生，改善线粒体膜电位失衡，抑制Bax/Caspase-3/GSDME信号通路介导的细胞焦亡发挥改善高糖诱导所致HK-2细胞损伤的作用。

［关键词］丹酚酸F；B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）相关X蛋白（Bax）/胱天蛋白酶-3（Caspase-3）/消皮素E（GSDME）信号通路；肾小管上皮细胞；细胞焦亡

［中图分类号］R2-0；R22；R242；R285.5［文献标识码］A［文章编号］1005-9903（2024）09-0056-09

［doi］10.13422/ki.syfjx［网络出版地址］https:///urlid/11.3495.R1519.002

［网络出版日期］2023-10-0813:54:38

SalvianolicAcidFRegulatesBax/Caspase-3/GSDMESignalingPathwaytoInhibitPyroptosisofHK-2Cells

SHIXiancong，XIEZhishen，ZHAOLiang，WANGJiajun，DUANYafei，WANGPan，ZHANGZhenqiang，ZHANGXiaowei*，XUJiangyan*

（AcademyofChineseMedicalSciences，HenanUniversityofChineseMedicine，Zhengzhou