植物器官培养.ppt

一、根培养（一）根培养的实践意义1.进行根系生理代谢研究的最优良试验体系。2.研究器官分化、形态建成的良好体系。3.建立快速生长的根无性系，对药物生产有重要意义。4.对根细胞培养物进行诱变处理，可筛选突变体，用于育种实践。第四节其他器官的培养第31页,共40页，2024年2月25日，星期天1.培养步骤离体根培养的第一步是要获得无性繁殖系。直接取室外植物的根系培养；植物种子，经灭菌后，在无菌条件下发芽，获得无菌苗，取根培养。种子表面消毒——无菌条件下萌发——根伸长后切取1.0cm长的根尖——接种于培养基——侧根生长——切取侧根的根尖扩大培养——获离体根无性系（二）离体根的培养方法第32页,共40页，2024年2月25日，星期天胡萝卜根培养第33页,共40页，2024年2月25日，星期天在一个培养瓶中，有液体和固体培养两个组成部分：根尖部分处于液体培养中，而根茎部分则插入含有有机成分的固体培养基中。可进行根系生长发育，营养代谢或结瘤试验。2.离体根培养的试验系统第34页,共40页，2024年2月25日，星期天此装置由2个部分组成，下部是试管，管中装有含无机盐的营养液，并接种根瘤菌；上部是玻璃盖，盖中有一单向开口的管状凹槽，槽中盛放含有有机化合物的琼脂固体培养基。故有机营养从根基部吸收，无机营养从根尖吸收。Bunting和Horrocks1964年修改了Raggio等的装置，变为在粗沙中提供无机盐。利用这一技术研究菜豆、大豆等离体根根瘤菌的固氮情况，结果表明这些根瘤菌含有血红蛋白，并能固定大气中的氮。Raggio1965年等设计了离体根的结瘤实验装置。第35页,共40页，2024年2月25日，星期天离体根培养多用无机离子浓度低的White培养基或其他培养基，MS、B5等也可采用，但必须将其浓度稀释到2/3或1/2。（三）离体根培养所用的培养基成份苜蓿浓度(mg/L)西红柿浓度(mg/L)Ca(NO3)2.4H2O200143.9Na2SO4200100KCl6540KNO382NaH2PO4.2H2O18.610.6MgSO4.7H2O740368.5MnSO4.4H2O4.53.35FeC6H5O7.3H2O42.25ZnSO4.7H2O2.71.34H3BO31.50.75KI0.80.38CuSO4.5H2O0.0040.002MoO30.020.01甘氨酸