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猕猴桃无病毒种苗生产技术规程

1适用范

本标准规定了猕猴桃病毒脱除方法、病毒检测方法、脱毒种苗保存与繁殖。

本标准适用于猕猴桃脱毒种苗繁育及猕猴桃病毒检测。

2术语和定义

下列术语和定义适用于本标准。

2.1茎尖培养脱毒Viruseliminationbyshoottipculture

切取0.2~0.5mm带毒试管苗茎尖，经组织培养获得无病毒植株的过程。

2.2茎尖超低温疗法脱毒Viruseliminationbyshoottipcryotherapy

切取1.0~2.0mm带毒试管苗茎尖，经液氮处理后进行组织培养获得无病毒植株的过程。

2.3热疗法结合茎尖培养脱毒Viruseliminationbythermotherapycombinedwithshoottip

culture

先对带毒试管苗进行热处理，热处理结束后取茎尖进行茎尖培养获得无病毒植株的过

程。

2.4化疗法结合茎尖培养脱毒Viruseliminationbychemotherapycombinedwithshoottip

culture

先将带毒试管苗置于含抗病毒药物的培养基中培养，培养结束后取茎尖进行茎尖培养

获得无病毒植株的过程。

2.5热疗法结合茎尖超低温疗法脱毒Viruseliminationbythermotherapycombinedwithshoot

tipcryotherapy

先对带毒试管苗进行热处理，热处理结束后取茎尖进行超低温处理，最后经组织培养

获得无病毒植株的过程。

2.6化疗法结合茎尖超低温疗法脱毒Viruseliminationbychemotherapycombinedwithshoot

tipcryotherapy

先将带毒试管苗置于含抗病毒药物的培养基中培养，培养结束后取茎尖进行超低温处

理，最后经组织培养获得无病毒植株的过程。

2.7化疗法结合热疗法和茎尖培养脱毒Viruseliminationbychemotherapycombined

withthermotherapyandshoottipculture

先将带毒试管苗置于含抗病毒药物的培养基中培养，之后进行热处理，热处理结束后

取茎尖进行组织培养获得无病毒植株的过程。

2.8热疗法结合化疗法和茎尖超低温疗法脱毒Viruseliminationbythermotherapycombined

withchemotherapyandshoottipcryotherapy

先将带毒试管苗置于含抗病毒药物的培养基中培养，之后进行热处理，热处理结束后

再取茎尖进行超低温处理，最后经组织培养获得无病毒植株的过程。

2.9无病毒母株virus-freemotherplant

通过病毒脱除处理或直接筛选获得的、经检测并确认不携带本文件规定的病毒的植株。

2.10无病毒苗木virus-freeseedling

未携带有本文件规定的病毒的猕猴桃苗木。

2.11无病毒母本园virus-freemotherblock

用于提供猕猴桃无病毒母株保存的圃地。

3脱毒原理

病毒在植物体内分布不均匀，植物茎尖顶端分生组织中的病毒含量较低甚至不含病毒，

热处理及抗病毒药物处理能够抑制病毒RNA的合成，因此可通过茎尖培养，或结合热疗

及化疗对植物病毒进行脱除；在茎尖超低温疗法脱除植物病毒中，茎尖经过冷冻保护处理

后转入液氮中冷冻时，分化程度较低、核质比大、自由水含量较低的茎尖顶端分生组织和

幼嫩叶原基细胞更容易存活。由于很多病毒无法侵入茎尖顶端分生组织，因此无病毒的顶

端分生组织可以在液氮冷冻后存活并再生为无病毒植株。

4病毒检测与脱除

4.1病毒种类

病毒种类见表A.1。包括猕猴桃病毒A（ActinidiavirusA，AcVA）、猕猴桃病毒B

（ActinidiavirusB，AcVB）、猕猴桃种传潜隐病毒（Actinidiaseedbornelatentvirus，

ASbLV）、猕猴桃黄化环斑病毒（Actinidiayellowingringspotvirus，AYRSpV）、猕猴桃

病毒1（Actinidiavirus1，AcV-1）