液相色谱基础知识HPLC与UPLC课件.pdf

液相色谱基础知识

HPLC与UPLC

Waters北京实验室

袁汉成

Han_cheng_yuan@

010

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色谱法简介

色谱法(Chromatography)溯源

–100多年前俄国植物学家Tswett(茨维特)分离植物色

素时采用的实验方法

–他将植物色素的石油醚提取液倒入装有碳酸钙的直

立玻璃管,再加入石油醚使其自由流下,结果色素中

各组份互相分离形成各种不同颜色的谱带

–Tswett用希腊语chroma(色)和graphos(谱)描述他

的实验方法，即现在的Chromatography(色谱法)

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Tswett的实验

•一根长玻璃管填充碳酸钙的

颗粒

•将碾碎之植物叶片的提取液

灌入柱中

•随着石油醚提取液向下流过

柱子，现出展宽的色带

•分离出不同的化合物

Chromato--颜色

Graphy--图像

注:Tswett：俄文的意思是颜色

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Tswett的色谱实验装置

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色谱法原理

色谱法的原理

–是利用混合物中各组份在不同的两相中溶解,分配,吸附

等化学作用性能的差异,当两相作相对运动时,使各组分

在两相中反复多次受到上述各作用力而达到相互分离

–两相中有一相是固定的,叫作固定相(Stationary

Phase),有一相是流动的,称为流动相(Mobile

Phase),流动相又叫洗脱剂,溶剂

相(Phase):

–物理化学术语,特指在某一系统中,具有相同成分及相同

物理、化学性质的均匀物质部分。各相之间有明显可分

的界面。

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色谱法原理

分离是一个

物理过程

固定相(StationaryPhase)

流动相(MobilePhase)

进样(Injection)

洗脱(Elution)

相互作用(Interaction)

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色谱法的分类

按流动相的物态分:

—气相色谱(GasChromatography,GC)

用气体作为流动相(又叫载气)

—液相色谱(LiquidChromatography,LC)

用液体作为流动相(又叫洗脱剂)

按固定相的形态分: