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取10%甘油中保存的菌种(DH5α)在LB培养基上划线,37℃
挑单菌落接种于3mlLB培养基中,37℃
取0.5ml过夜培养的菌液,转接入50ml的灭过菌的LB液体培养基中(1:100稀释),37℃振荡培养,使菌液的OD600
4℃,6000g
加入10ml冰预冷的0.1MCaCl2,冰上放置20min,
4℃,6000g
加入1-2ml冰预冷的0.1MCaCl2重悬菌体,4℃
加10-15%的甘油,每管100-200μl分装,然后-70℃
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