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O型FMDV衣壳抗原的耐酸改造及其在昆虫细胞中的表达中期报告
1.背景
口蹄疫是一种由口蹄疫病毒(FMDV)引起的急性、高度接触性的疾病,对牲畜业造成了巨大的经济损失和社会影响。病毒衣壳抗原是诱导免疫应答的主要组成部分,可以作为疫苗的重要成分。然而,FMDV衣壳抗原在制备和储存过程中对环境的敏感性较强,易受到酸性环境的影响,可能导致其免疫原性和稳定性的下降。因此,对FMDV衣壳抗原进行耐酸改造,可以提高其稳定性和免疫原性,为口蹄疫疫苗的研发提供更好的材料基础。
2.目的
本研究的目的是对O型FMDV衣壳抗原进行耐酸改造,并在昆虫细胞中进行表达,评估其表达效果和抗原性能,为口蹄疫疫苗的研发提供新的材料基础。
3.方法
(1)耐酸改造:在FMDV衣壳抗原中引入不同程度的疏水性氨基酸,提高其耐酸性和疏水性。构建了改造前后衣壳抗原的DNA序列,并进行生物学分析和基因表达检测。
(2)表达:将改造后的O型FMDV衣壳抗原基因序列构建到昆虫细胞表达载体中,通过转染昆虫细胞表达改造后的衣壳抗原蛋白。使用SDS和Westernblotting检测表达蛋白的大小和抗原性。
(3)其他实验:进一步进行衣壳抗原蛋白的纯化、抗原性评价和免疫原性试验等。
4.预期结果
通过耐酸改造后的O型FMDV衣壳抗原,在昆虫细胞中成功表达。经过纯化和抗原性评价后,可以进一步进行免疫原性试验,评估其在动物体内的免疫保护效果。本研究的结果可以为FMDV疫苗的研发提供新的材料基础。
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