呼吸道标本采集和结果解读.ppt

*******************SputumgramstainshoingepithelialcellsandGpcinchains*******************粒缺患者肺炎的致病菌CurrOpinPulmMed2015,21:260–271第31页,共55页，2024年2月25日，星期天*对于确诊IA：GM的诊断效能CurrOpinPulmMed2015,21:260–271第32页,共55页，2024年2月25日，星期天*粒缺肿瘤肺炎：微生物学评价BAL是很好的诊断工具CurrOpinPulmMed2015,21:260–271第33页,共55页，2024年2月25日，星期天*恶性粒细胞减少患者的肺炎诊断临床评估+微生物学评估+分子微生物学评估：①最可靠：从无菌部位分离or呼吸道分泌物中非共生菌②BAL是首选下呼吸道标本，越早采集越好，尤其使用抗生素之前，但不能延误治疗③支气管活检（TBBX）可揭示侵入血流感染，但培养不优于BAL，且因为恶性粒细胞减少继发血小板减少使得并发症风险高④分子方法：半乳甘露聚糖分子试验测试侵袭性曲霉病（FDA已经批准）ScottE.EvansandDavidE.Ost,Pneumoniaintheneutropeniccancerpatient,Infectiousdiseases,2015,21(3):261-271第34页,共55页，2024年2月25日，星期天*日均痰标本与BAL送检对比*第35页,共55页，2024年2月25日，星期天BAL标本量要求生理盐水总灌入量不少于100ml，分3-5份进行（标准为200-240ml，分4等份进行）好的BAL标本，至少30%灌入液回收30%回收率的被视作不合格，需要重新采集（尤其是10%回收率的标本）MeyerKC,AnofficialAmericanThoracicSocietyclinicalpracticeguideline:theclinicalutilityofbronchoalveolarlavagecellularanalysisininterstitiallungdisease,AmJRespirCritCareMed.2012May1;185(9):1004-14第36页,共55页，2024年2月25日，星期天*肺泡灌洗液标本的优点BALF标本培养的阳性率高，合格率高BALF的采集不需要患者的配合【1】BALF能避免上呼吸道的定植菌的污染，减少对培养结果判断的干扰。*1.AmericanThoracicSociety,InfectiousDiseasesSocietyofAmerica.GuidelinesontheManagementofCommunity-AcquiredPneumoniainAdults,2007:44(Suppl2)第37页,共55页，2024年2月25日，星期天*肺泡灌洗液标本的处理*将所有标本装入50ml离心管内漩涡震荡30-60s每个平板定量涂10μLUsepipette.用吸管吸取0.1ml至1mlTSB（1：10稀释）生长出10个菌落培养后菌落计数：相同形态菌落数×103CFU/mL

制作涂片（细胞离心)血平皿巧克力平皿麦康凯平皿若用接种环密涂平板，生长的菌落数量会低于实际数量。但用L棒涂布平板计数，定量培养结果更准确第38页,共55页，2024年2月25日，星期天*肺泡灌洗液的涂片革兰染色适量BALF标本进行细胞离心，经自然干燥、甲醇固定或火焰快速固定3次，革兰染色标本质量判断以扁平鳞状上皮细胞占全部细胞比例1%为合格标本敏感度为104个细胞/mL，若每个油镜视野可见1个或多个细菌，报告革兰染色形态及白细胞结果，提示此菌与活动性肺炎相关。*PatrickRM.Manualofclinicalmicrobiology.9thed.US:ASMPress,2007:307-308中华人民共和国卫生行业标准——下呼吸道感染细菌培养操作规范[S].第39页,共55页，2024年2月25日，星期天*肺泡灌洗液定量培养的意义细菌性感染，浓度阈值104CFU/mL，低于阈值浓度时，定植可能性大;高于阈值时，感染可能性大。真菌性感染，目前没有BAL的诊断性阈