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SCIN基因影响结直肠癌肝转移发生的相关信号通路研究开题报告
一、研究背景
结直肠癌是全球范围内常见的恶性肿瘤之一,同时也是一种高度影响生活质量和预后的癌症。结直肠癌肝转移是结直肠癌患者生存期极大缩短的原因之一。SCIN是组织蛋白酶抑制剂,已经被证实在多种癌症中表达水平较低。必威体育精装版的研究表明,SCIN的表达水平与结直肠癌肝转移的发生率有一定的相关性。因此,本研究将针对SCIN基因进行深入研究。
二、研究目的
本研究将从两个角度来探讨SCIN基因对结直肠癌肝转移的影响:一是从肝癌细胞外基质(ECM)的角度来研究SCIN基因是否影响ECM的合成、降解及其对结直肠癌肝转移的迁移作用;二是从信号通路的角度来研究SCIN基因是否参与AKT通路和Wnt/β-catenin通路,与结直肠癌肝转移的关系。
三、研究计划
1.实验设计
本实验将使用结直肠癌细胞株HCT116进行实验,将SCIN基因的表达水平通过siRNA的方式实现下调,观察HCT116细胞的迁移能力和ECM的合成和降解情况。同时,通过Westernblot和RT-PCR技术检测AKT通路和Wnt/β-catenin通路的相关蛋白和基因的表达水平及变化趋势,分析SCIN基因是否参与这两个通路的调节。
2.实验步骤
(1)细胞培养:将HCT116细胞在含10%胎牛血清的DMEM中培养至70%的接种密度。
(2)细胞转染:将SCINsiRNA转染至培养完备的HCT116细胞中,观察细胞外观及细胞周期的变化情况。
(3)Transwell实验:将分别处理好的HCT116细胞放置于Transwell上,加入不含血清的DMEM,观察细胞迁移情况。
(4)ECM的制备与检测:通过Westernblot技术检测HCT116细胞系下SCINsiRNA处理过程中,ECM相关基因的表达水平及变化情况。
(5)Westernblot和RT-PCR技术:检测AKT通路和Wnt/β-catenin通路相关蛋白和基因的表达水平及变化趋势。
四、研究意义
SCIN基因作为一种重要的组织蛋白酶抑制剂,在多种恶性肿瘤中的表达水平下降已被证实。本研究将通过实验证明SCIN基因表达水平与结直肠癌肝转移的相关性,同时探讨SCIN基因与AKT通路和Wnt/β-catenin通路的关系,为结直肠癌肝转移的预防和治疗提供新的思路和策略,有一定的临床意义和应用价值。
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