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北京科技大学
环境工程
微生物学
李冰副教授
如何观测微生物
微生物的观测设备
普通生物显微镜普通荧光显微镜
放大倍数？
目镜和物镜的乘积，
一般在40-1000倍
微生物的观测设备普通显微镜图片
大肠杆菌生长的明场图片具有荧光的大肠杆菌图片
（40倍物镜拍摄，标尺10μm）（20倍物镜拍摄）
微生物的观测设备
激光共聚焦显微镜(ConfocalLaserScanningMicroscopy，CLSM)
用激光束代替传统的汞灯或长效金属卤素灯作为激发光，可以对观察
样品进行断层扫描和三维成像
放大倍数同普通显微镜普通荧光显微镜与激光
共聚焦显微镜图片对比
微生物的观测设备
电子扫描显微镜（ScanningElectronMicroscope，SEM）
活性污泥样品
最大可放
大20万倍
10μm10μm5μm20μm
杆菌球菌酵母菌曲霉
微生物的观测设备
举例：普通显微镜和电子扫描显微镜图片对比
大肠杆菌在不同浓度的阿莫西林下的生长情况
普通显微镜：放大400倍SEM：放大5000倍
标尺：10μm标尺：10μm
微生物样品的制备
显微镜观测样品
悬浮液体样品
滴管、浓度（浓缩或稀释）
载玻片、盖玻片
液体样品计数时可直接测试
微生物样品的制备
扫描电镜观测样品
液体样品离心浓缩、固定、脱水、冷冻干燥、喷金
液体培养基
的菌落
8000离心戊二醛固定粘样镀膜
2~5分钟脱水干燥上机观测
固体培养基
刮下
的菌落,先
菌落
滴固定液
微生物的计数方法
传统方法：血球计数板检测细菌数量
如何得出结果呢？
微生物的计数方法
显微镜图片计数
显微镜自带的拍摄软件
ImageJ软件（开源软件）：微生物数量、大小、面积等都可以分析
微生物的计数方法
流式细胞仪（FlowCytometer）
分析荧光细菌的数量
特定
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