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北京科技大学
环境工程
微生物学
董颖博副教授
培养基的配制
制作美味“食谱”
培养基的配制原则
（1）目的明确
➢培养哪种微生物？
➢培养何种营养类型的微生物？（自养、异养）
➢根据不同微生物的营养需求，供给合适的C、N及无机元素等
培养基的配制原则
（2）营养协调
➢C：N比例及浓度适当（C/N一般取100:0.2～2.0）
➢HOC+能源N源P、SK、Mg生长因子
2
培养基的配制原则
（3）高温高压灭菌
2
➢在103.4kPa（1.05kg/cm）、121.3℃，
灭菌15～30min
高压灭菌锅
培养基的配制原则
（4）理化条件要适宜：pH值、渗透压、氧化还原电位、温度
➢生长pH值范围：细菌7.0～8.0，放线菌7.5～8.5
霉菌4.0～5.8，酵母菌3.8～6.0
➢微生物新陈代谢产酸产碱，故要调节
培养基的配制原则
培养基pH值调节方法：
➢pH的外源调节：
按实际需要不断流加酸液或碱液到培养液中。
➢pH的内源调节：
采用磷酸缓冲液、加入CaCO或NaHCO做“备用碱”
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（原理？）
培养基pH内源调节原理
⚫采用磷酸缓冲液
➢调节KHPO、KHPO摩尔分数比可获得pH6.0-7.6一系列稳定pH值溶液，
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当两者等摩尔分数比时，溶液pH值可稳定在6.8
KHPO＋HCl→KHPO＋KCl
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KHPO＋KOH→KHPO＋HO
24242
⚫采用CaCO做“备用碱”
3
➢CaCO在水溶液中溶解度极低，加入到培养基不会使pH值升高。当微生物
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生长过程中产酸时，它就逐渐被溶解。
➢因为CaCO在配成培养基中分布不均匀，也可用NaHCO来调节。
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培养基的配制原则
（5）经济节约：价格低廉、来源广、注意纯度
A.以“野”代“家”
B.以粗代精
C.以废代好
D.以简代繁
E.以烃代粮
F.以纤代糖优级纯分析纯化学纯
G.以氮代朊
H.以国产代替进口杂质可能会影响菌种生长发育
培养基配制的操作步骤
外源内源
称量溶解灭菌
调pH调pH
为防止沉淀，培养过程中
培养基加EDTA或10%NaOH可能产酸、高压蒸
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