动物细胞与组织培养.ppt

（5）提供PH\缓冲物质，调节培养基PH。

（6）影响培养系统中的某些物理特性如：剪切力、黏度、渗透压和气体传递速度等。第91页,共99页，2024年2月25日，星期天血清可能引发的问题

（1）所有的血清都是一种成分不确定的混合物，批与批血清之间的组分存在差异；

（2）血清中含有某些不利于细胞生长的毒性物质或抑制物质，对某些细胞的体外培养有去分化作用。(血清来源于动物，有可能携带传染源，包括病毒和有毒物质，对正在生长的细胞系或者制品带来风险)

第92页,共99页，2024年2月25日，星期天（3）血清中大量成分复杂的蛋白质给疫苗、细胞因子、单克隆抗体等细胞产品的分离纯化带来很大困难。

?(4)培养液营养的不足，细胞密度低、活力低，影响了细胞表达，导致疫苗等生物制品的生产效率和产量低。第93页,共99页，2024年2月25日，星期天celllin第94页,共99页，2024年2月25日，星期天第95页,共99页，2024年2月25日，星期天细胞系或细胞株的命名HeLa：为供体患者的姓名（来源于宫颈癌）

CHO：中国地鼠卵巢细胞（ChineseHamsterOvary）宫-743：宫颈癌上皮细胞，1974年3月建立

NIH3T3：美国国立卫生研究院（NationalInstituteofHealth）建立；每3天传代，每次接种3×105细胞／毫升。

第96页,共99页，2024年2月25日，星期天第97页,共99页，2024年2月25日，星期天第98页,共99页，2024年2月25日，星期天感谢大家观看第99页,共99页，2024年2月25日，星期天**动物细胞虽可像微生物细胞一样,在人工控制条件的生物反应器中进行大规模培养,但其细胞结构和培养特性与微生物细胞相比,有显著差别:①动物细胞比微生物细胞大得多,无细胞壁,机械强度低,对剪切力敏感,适应环境能力差;②倍增时间长,生长缓慢,易受微生物污染,培养时须用抗生素;③培养过程需氧量少(氧传质系数kLa大于10h-1即可满足每毫升107个细胞的生长);④培养过程中细胞相互粘连以集群形式存在;⑤原代培养细胞一般繁殖50代即退化死亡;⑥代谢产物具有生物活性,生产成.本高,但附加值也高。?动物细胞虽可像微生物细胞一样,在人工控制条件的生物反应器中进行大规模培养,但其细胞结构和培养特性与微生物细胞相比,有显著差别:①动物细胞比微生物细胞大得多,无细胞壁,机械强度低,对剪切力敏感,适应环境能力差;②倍增时间长,生长缓慢,易受微生物污染,培养时须用抗生素;③培养过程需氧量少(氧传质系数kLa大于10h-1即可满足每毫升107个细胞的生长);④培养过程中细胞相互粘连以集群形式存在;⑤原代培养细胞一般繁殖50代即退化死亡;⑥代谢产物具有生物活性,生产成.本高,但附加值也高。**胰岛肝细胞**cease[简明英汉词典][si:s]v.停止,终了**细胞的生长和迁移朔型**原代培养后得到细胞系，再经多次传代培养后，一部分细胞死亡，一部分细胞继续生长并转化为连续细胞系或无限细胞系。

**在医学遗传学研究中应用最广泛的是外周血淋巴细胞、皮肤或纤维细胞和各种能在体外长期生长的细胞系。外培养细胞株可在培养过程中发生自发的或在外界作用下的转化，成为永久细胞系，也可直接建成永久细胞系，永久细胞系能在体外无限制的传代和生长。**体外培养细胞根据它们在培养器皿是否能贴附于支持物上生长特征，可分为贴附型生长和悬浮型生长两大类**常见于羊水细胞培养的早期。

**体外生长不必贴壁，可在培养液中悬浮生长，因此也叫悬浮型细胞。一些在体内原本就以悬浮状态生长的细胞或微生物，当接种于体外环境中也可以以悬浮状态生长。**温度：温度除直接影响细胞生长外，还与培养液的pH值有关，温度低时CO2溶解性增加，从而影响pH。**二氧化碳既是细胞代谢产物，也是细胞生长繁殖所需成分，它在细胞培养中的主要作用在于维持培养基的PH值。大多数细胞的适宜PH为7.2-7.4，偏离这一范围对细胞培养将产生有害的影响。但细胞耐酸性比耐碱性大一些，在偏酸环境中更利于细胞生长。有资料显示，原代羊水细胞培养PH6.8时最适。

**清洁，无污染单细胞比群落细胞更难培养合适的培养基和溶液**保证无微生物污染**玻璃器皿也要用重蒸水反复冲洗。**过滤器：过滤除菌：大多数培养用液，如人工合成培养基、血清、酶液等均采用滤过法除菌**根据实验要求准备好已消毒的所需用品，清点无误后放在超净