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单克隆抗体的制备及其应用争论进展

燕珊珊

摘要:单克隆抗体技术的突破为医学和生物学的根底争论开创了纪元。基因工程抗

体技术的进展更为疾病治疗、临床试验和科研方面做出巨大奉献。此外，抗体还可

能执行除目前所具有之外的更多功能。本文将就单克隆抗体的制备及其应用争论进

展进展论述。

关键词:单克隆抗体；基因工程；小鼠骨髓瘤细胞；细胞杂交瘤技术；噬菌体；

临床应用

抗体是机体免疫系统的重要效应分子，从第一代多克隆抗体

〔polyclonalantibody,PcAb〕到其次代单克隆抗体的成功制备，人们投入了大量

的临床应用争论，对医学和生物学的进展发挥了巨大的作用。

单克隆抗体〔monoclonalantibodies，mAbs〕技术的突破为医学和生物学的

根底争论开创了纪元。基因工程抗体技术的进展更为疾病治疗、临床试验和科研方

面做出巨大奉献。目前，制备mAbs的方法中比较成熟的主要有以下几种：1.抗原

特异性的B淋巴细胞杂交瘤技术；2.人-鼠嵌合抗体制备技术；3.噬菌体展现技术

获得的抗原特异性人源性抗体；4.转基因小鼠制备的人mAbs；5.核糖体展现技术。

通过这些方法，我们利用相应抗原靶向构建治疗性抗体，从而到达预防、治疗疾病

的目的，促进生物制药学的进展。以下主要是对抗体制备技术的进展及其应用争论

进展进展综述。

1鼠源性抗体

1975年，Kohler和Milstein[1]将小鼠骨髓瘤细胞和经绵阳红细胞免疫的

小鼠脾细胞融合，形成了可产生单克隆抗体的杂交瘤细胞，该细胞既能产生抗体，

又可无限增殖，从而创立了单克隆抗体杂交瘤技术。由免疫B细胞-浆细胞、瘤细胞

融合形成的杂交瘤细胞系可分泌单一、特异性、纯化的抗体，且能在选择培育基中

生长、无限增值、分裂，同时在选择培育基作用下，利用代谢缺陷补救机理筛选出

同时具有两种细胞特征的细胞克隆。这种经过反复克隆而选择出来的融合细胞所产

生的抗体称为单克隆抗体(McAb)。它在分子构造、氨基酸序列以及特异性等方面都

是全都的。淋巴细胞杂交瘤技术的主要步骤包括：动物免疫、细胞融合、杂交瘤细

胞的筛选与单抗检测、杂交瘤细胞的克隆化、冻存、单抗的鉴定等。至今，科学家

们已经建立众多鼠源性mAbs来诊断和治疗多种人类疾病。然而作为在人体内的应

用，鼠源单抗尚存在一些问题。鼠源性抗体作为异种蛋白应用于人体可引起免疫反响

，产生人抗鼠抗体〔humananti-mouseantibody,HAMA〕[2]，很大程度上限制了

mAbs的临床应用。此外，鼠源性mAbs不能与人类抗体FcRn结合[3]。为了抑制以

上这些问题，近年，随着分子生物学的进展，人们已有可能通过抗体工程技术制备

人-鼠嵌合抗体、人源化抗体或全人抗体。

2人-鼠嵌合抗体

嵌合抗体指的是鼠mAbs的恒定区基因被人Abs的恒定区基因通过基因重组

技术所替换而编码产生的单克隆抗体[4-5]。这样既能保持鼠单抗的特性，又使获

得的单抗降低了在人体内的免疫反响。Jones[6]等在20世纪80年月中期首次成功

构建了小鼠抗半抗原-4-羟基-3-硝基苯乙酰基己酸(NP)的免疫球蛋白VH基因，并

最终获得可特异结合NP的人源化嵌合抗体，再通过定点突变法进展单纯的CDR移植

构建，形成第一代人源化抗体。随后还相继研发了阿昔单抗〔抗GPIIb-IIIa鼠-人嵌

合抗体〕、美罗华(Rit-uximab)、Cetuximab(C225，Erbitux)、Zevalin和Bexxa等

嵌合抗体，现均已被广泛应用于科学争论与疾病诊断之中。

CDR移植抗体，又称改型抗体，它是在嵌合抗体的根底上，利用基因工程技

术，进一步用人的FR代替鼠FR，形成的只剩3个鼠源CDR的、更为完全的人源化抗

体。由于具有支持作用的FR不仅为CDR的设想供给了环境，还参与抗体结合位点正

确构像的形成和抗原的结合，常常使得CDR移植抗体的亲和力和特异性大大降低，

有的甚至还丧失了抗原结合力量[7]。通过大量争论，我们觉察选用与鼠源单抗具有

高度同源性的人源抗体，但保存鼠源单抗中的一些关键氨基酸残基，并在此根底上，

对鼠CDR和FR的一些外表氨基酸残基进展修饰或重塑，对关键氨基酸残基进展肯定

的转变，能在保存CDR移植抗体的亲和力和特异性下，大大降低其免疫原性。因此，

相对于嵌合抗体，其次代人源化