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E2泛素交联酶RAD6在人类细胞周期中调控基因表达的机制研究的开题报告

题目:E2泛素交联酶RAD6在人类细胞周期中调控基因表达的机制研究

研究背景及意义:细胞周期是细胞生物学中十分重要的过程之一,包括G1、S、G2和M四个阶段。在细胞周期中,基因表达的变化会影响细胞的增殖、分化和凋亡等生物学过程。泛素连接系统(UPS)是一种广泛存在于真核细胞中的重要调控机制,涉及到许多生命活动的调控,包括蛋白稳定性、细胞周期、DNA修复、基因转录等。在这个系统中,E2泛素连接酶RAD6是一个重要的组成部分,它能够通过作用于某些关键基因,调控它们的表达,从而影响细胞周期的进行。

研究目的:本研究旨在探究E2泛素连接酶RAD6在人类细胞周期中调控基因表达的机制,以期进一步理解E2泛素连接酶RAD6在细胞周期中所扮演的角色。

研究内容:本研究主要包括以下内容:

1、构建基因编辑技术辅助的RAD6基因敲除细胞模型,验证RAD6在细胞周期中的作用。

2、利用RNA测序技术对RAD6基因敲除细胞和对照细胞的基因表达谱进行分析,筛选出不同表达基因,并对其注释进行功能富集分析。

3、利用ChIP-Seq技术分析RAD6在细胞周期中的靶基因,进一步揭示RAD6对基因的调控机制。

研究方法:本研究主要采用以下技术手段:

1、基因编辑技术:利用CRISPR/Cas9等基因编辑技术构建RAD6基因敲除细胞模型。

2、RNA测序技术:利用RNA测序技术对RAD6基因敲除细胞和对照细胞的基因表达谱进行分析。

3、功能富集分析:对基因表达谱中筛选出来的不同表达基因进行功能富集分析,揭示RAD6在细胞周期中可能涉及的关键生物学过程。

4、ChIP-Seq技术:利用ChIP-Seq技术分析RAD6在细胞周期中的靶基因,并进一步揭示RAD6对基因的调控机制。

研究预期成果:本研究预期得到RAD6在人类细胞周期中调控基因表达的机制研究,包括RAD6对某些基因的直接修饰、转录因子的招募以及核蛋白修饰等方面的调控机制。同时,本研究可望揭示RAD6在基因表达的调控中所扮演的角色,为研究细胞周期、肿瘤发生等重大问题提供帮助和参考。

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