高考生物真题按知识点分类汇编 6PCR技术的基本操作和应用.pdf

PCR技术的基本操作和应用

本卷整理：【粤】蓝色冰点（庞淇尹广东省吴川市第一中学）

2012江苏22.下列事实能体现细胞全能性的是（）

A.棉花根尖细胞经诱导形成幼苗B.单细胞的DNA在体外大量扩增

C.动物杂交瘤细胞产生单克隆抗体D.小鼠体细胞经诱导培育成小鼠

【答案】AD

【解析】在多细胞生物中每个体细胞的细胞核具有个体发育的全部基因，只要条件许

可，都可发育成完整的个体。要能产生完整的个体，才能体现全能性。

【试题点评】本题考查细胞全能性这一知识点，要求学生能根据细胞全能性的原理，

对一些现象进行分析。属于理解层次。

2011江苏33．（8分）请回答基因工程方面的有关问题：

(1)利用PCR技术扩增目的基因，其原理与细胞内DNA复制类似（如下图所示）。图

中引物为单链DNA片段，它是子链合成延伸的基础。

①从理论上推测，第四轮循环产物中含有引物A的DNA片段所占的比例为。

②在第轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段。

(2)设计引物是PCR技术关键步骤之一。某同学设计的两组引物（只标注了部分碱基序

列）都不合理（如下图），请分别说明理由。

-1-/7

①第1组：；②第2组：。

(3)PCR反应体系中含有热稳定DNA聚合酶，下面的表达式不能正确反映DNA聚合酶的

功能，这是因为。

(4)用限制酶EcoRV、Mbol单独或联合切割同一种质粒，得到的DNA片段长度如下图(1

kb

即1000个碱基对)，请在答题卡的指定位置画出质粒上EcoRV、Mbol的切割位点。

33．（8分）

(1)①15/16②三

(2)①引物I和引物Ⅱ局部发生碱基互补配对而失效

②引物I’自身折叠后会出现局部碱基互补配对而失效

(3)DNA聚合酶只能将单个脱氧核苷酸连续结

合到双链DNA片段的引物链上

(4)见右图

2011北京31.（16分）

T-DNA可随机插入植物基因组内，导致被插入基因

发生突变。用此方法诱导拟南芥产生突变体的过程如下：种植野生型拟南芥，待植株形成

-2-/7

花蕾时，将地上部分浸入农杆菌（其中的T-DNA上带有抗除草剂基因）悬浮液中以实现转

化。在适宜条件下培养，收获种子（称为代）。

（1）为促进植株侧枝发育以形成更多的花蕾，需要去除，因为后者产生的

会抑制侧芽的生长。

（2）为筛选出已转化的个体，需将T代播种在含的培养基上生长，成熟后自

交，收获种子（称为T代）。

（3）为筛选出具有抗盐性状的突变体，需将T代播种在含的培养基上，获

2

得所需个体。

（4）经过多代种植获得能稳定遗传的抗盐突变体。为确定抗盐性状是否由单基因突变

引起，需将该突变体与植株进行杂交，再自交代后统计性状分离比。

（5）若上述T-DNA的插入造成了基因功能丧失，从该突变体的表现型可以推测野生型

基因的存在导致植物的抗盐性。

（6）根据T-DNA的已知序列，利用PCR技术可以扩增出

被插入的基因片段。其过程是：提取植株的

DNA，用限制酶处理后，再用将获得的DNA片段

连接成环（如右图）以此为模板，从图中A、B、C、D四

种单链DNA片断中选取