DERA酶的原核表达及阿托伐他汀钙手性中间体的生物合成的开题报告.docxVIP

DERA酶的原核表达及阿托伐他汀钙手性中间体的生物合成的开题报告

标题：DERA酶的原核表达及阿托伐他汀钙手性中间体的生物合成

背景和目的：

阿托伐他汀钙是一种广泛用于治疗高胆固醇症的降低血脂药物。它是由一系列复杂的生物合成步骤制备而成的，其中DERA酶作为关键酶之一，在生物合成过程中起着重要作用。在药物工业中，常常采用大肠杆菌等原核表达系统大量制备该酶，用于生产阿托伐他汀钙。

因此，本研究旨在通过原核表达系统制备DERA酶，并进一步研究其在阿托伐他汀钙生物合成中的作用，为药物工业生产提供理论和技术支持。

方法：

1.利用PCR技术从源菌基因组中扩增DERA酶基因；

2.将扩增后的基因克隆到原核表达载体中，将载体转化进入大肠杆菌，利用IPTG诱导表达；

3.采用SDS和Westernblot等分析方法对表达情况进行检测和分析；

4.利用阿托伐他汀钙手性中间体的生化合成反应检测DERA酶的活性和手性选择性。

结果：

1.成功扩增了DERA酶基因；

2.实现了DERA酶的原核表达，并获得了高产的表达蛋白；

3.确定了DERA酶在阿托伐他汀钙生物合成中的重要性，并证明其对手性中间体的选择性作用；

4.提供了一种高效的生产方式，通过表达系统大量生产DERA酶，从而提高阿托伐他汀钙的生产效率。

结论：

本研究成功实现了DERA酶的原核表达，并探究了其在阿托伐他汀钙生物合成中的作用。结果表明，DERA酶在该生物合成过程中具有关键作用，其手性选择性也对合成产物的构成产生了影响。因此，利用原核表达系统大量生产DERA酶，有望提高阿托伐他汀钙的生产效率和产量。