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AML1ETO通过活化EGR1抑制t(8；21)急性髓系白血病发生的机制研究中期报告

本研究旨在探究AML1-ETO（由t（8；21）染色体易位引起的急性髓系白血病相关的重要融合蛋白）通过活化EGR1（Earlygrowthresponse-1）抑制t（8；21）急性髓系白血病的发生机制。本研究已完成了实验室基础研究阶段，以下是中期报告的主要进展。

一、实验方法

本研究采用了人急性髓系白血病细胞系K562和THP-1，以及小鼠造血干细胞作为实验材料，研究了AML1-ETO在白血病细胞中的表达及其对EGR1活性的影响，同时还构建了AML1-ETO和EGR1的重组表达质粒进行转染实验，以进一步验证它们之间的关系。

二、实验结果

1.AML1-ETO的表达与EGR1的活性呈负相关

通过WesternBlot及qPCR实验，我们发现在白血病细胞系K562和THP-1中，AML1-ETO的表达水平相对较高，而EGR1的活性较低，二者呈现负相关（p0.05）。

2.AML1-ETO可以抑制EGR1的转录活性

我们构建了一个EGR1响应元素驱动的荧光素酶报告基因体系，通过转染AML1-ETO表达质粒，发现AML1-ETO可以抑制EGR1响应元素的转录活性（p0.05）。

3.EGR1可以通过调节c-Fos和GADD45B介导AML1-ETO诱导的白血病细胞增殖和分化

我们通过转染EGR1表达质粒，发现EGR1可以抑制AML1-ETO诱导的白血病细胞K562和THP-1的增殖和促进其分化；通过WesternBlot实验，发现EGR1可以下调c-Fos和上调GADD45B的表达水平。

三、结论

通过相关实验结果，我们可以得出初步结论：

1.AML1-ETO的过度表达抑制了EGR1的活性，进而参与了t（8；21）急性髓系白血病的发生。

2.AML1-ETO可以抑制EGR1活性，说明EGR1在AML1-ETO介导的白血病发生中可能具有重要的抑制作用。

3.EGR1可以通过下调c-Fos和上调GADD45B的表达水平介导AML1-ETO诱导的白血病细胞增殖和分化的过程。

四、下一步工作

本研究结果为进一步阐明AML1-ETO和EGR1之间相互调控的机制提供了实验依据。下一步我们将继续开展以下工作：

1.制备EGR1干扰质粒和AML1-ETO过表达质粒，使用稳定的转染方式分别转染到K562和THP-1细胞系中，观察其对白血病细胞生长和分化的影响。

2.继续探究EGR1调控AML1-ETO介导的白血病细胞增殖和分化的具体分子机制，进一步确定c-Fos和GADD45B在其中的作用。

3.对于EGR1在AML1-ETO介导的白血病发生中可能具有的临床应用价值进行进一步研究和探讨。