过氧化氢（H2O2）酶联免疫分析试剂盒使用说明书.pdf

过氧化气〈H2O2)》酶联免疫分析试剂盒使用说明书

使用目的;

本试剂爹用于测定水中过氧化氧〈《H2O2)》含量。

实验原理

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中过氧化氢〈H202)水拉。用丝化的过氧化氢

(H202)抗体包被微孔板,制成加相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入过氧化氧(H2O2)，

再与HRP标记的过氧化气《H202)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底

洗涤后如底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成监色，并在酸的作用下转化成最

终的黄色。颜色的深线和样品中的过氧化握(H202)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下

测定吸光度(OD侦》，授过标准曲线计算样山中过氧化气《H2O2)浓度。

试剂盒组成

130倍浓缩洗涤液20mlx1瓶7终止液tmIX1拒

2酶标试剂mlX1瓶8标准册(40pghml)0.SmlX1瓶

3酶标包被板12妃X8条9标准品稀释液1.5mlX1卸

4样品稀释液6mlIX1瓶10说明书1份

5显色剂A液mlx1瓶11封板膜2张

6显色剂B攻bmlX1/瓶12密封袋1个

标本要求

1，标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提到后应尽快进行实验。若不能

杞上进行试验，可将标本放于-20C保存，但应避免反复冻融

2不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的《HRP)活性。

探作稍又

1.标准品的稀释:水试剂盒撕供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀

释。

20pgiml5续标浴品150hl的诛售标准品加入150u标准品稀释液

10pgjml4号标准品150hl的5号标准品加入150hl标准品稀攻液

5pgjml3号标准品150hl的4号标准品如入150hl标准品稀释液

2.5pghml2号标准品150nl的3号标准品加入150hl标准品稀释液

1.25pgyml1号标准品150nl的2号标准品加入150nl标准上部稀释液

2.加样，分别设空白孔《空白对照孔不加样唱及酶标试剂，其余各步操作相癌)、标准孔、

待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加翌50kl，待测样品孔中先加样品稀释液40H，

然后再加待测样品10kl〈样帅最终稀释度为5倍)。加禅将样品加于酶标板孔底府，尽

虽不和帮孔壁，轻轻晃动混色。

3.温育，用封板膜封板后冒37温育30分钟。

4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备几

5.洗涤:小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗漂液，静置30秒后弃去，如此

重复5次，拍干。

6.加酶，每孔加入酶标试剂590ul，空白孔除外。

7.温育:操作同3。

8洗洗:操作阿5。

9.显色:每孔先加入显色剂A50H]，再加入显色剂B50hl，轻轻震荡混匀，37C避光显色

15分钟.

10,终止:每孔加终小液30k1，终下反应〈此时蓝色立转黄色)。

11.测定:以空白空调过，450nm淫