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测定方法:常用的是Zimmermann反应①水解浓盐酸加热或酶,结合型→游离型。②抽提乙醚或氯仿。③碱化NaOH,去除酸性类固醇和酚类。④显色17-KS中的酮-亚甲基(-CO-CH2-)与间二硝基苯作用生成紫红色化合物。【正常参考值】男性27.8~76.3μmol/24h女性20.8~52.0μmol/24h精密度较好,但灵敏度低,费时,干扰物多。第53页,共76页,2024年2月25日,星期天【临床意义】尿17-KS测定主要反映睾丸功能和肾上腺皮质分泌功能。①17-KS↑肾上腺皮质功能亢进(库欣综合症),睾丸间质细胞瘤,垂体前叶功能亢进。②17-KS↓肾上腺皮质功能减退(阿狄森病),垂体前叶功能减退第54页,共76页,2024年2月25日,星期天(2)尿17-羟类固醇(17-OHCS)测定结构特点C17、C21有羟基,C20有酮基。主要包括皮质醇、皮质素及代谢产物,四氢皮质醇、四氢皮质素等。测定方法:常用的是Porter-Silber反应①抽提氯仿-正丁醇(10:1),同时加入H2SO4降低溶解度,向有机相转移。②显色与苯肼在硫酸溶液中反应。生成黄色的苯腙。410nm【正常参考值】男性8.3~27.6μmol/24h女性5.5~22.1μmol/24h条件简单,试剂易得,特异性差,干扰多。第55页,共76页,2024年2月25日,星期天【临床意义】尿17-OHCS主要反映肾上腺皮质分泌功能。①17-OHCS↑肾上腺皮质功能亢进,肾上腺皮质肿瘤及增生,肥胖,甲亢。②17-OHCS↓肾上腺皮质功能减退、垂体前叶功能低下、肾上腺切除术后。第56页,共76页,2024年2月25日,星期天二、肾上腺髓质功能测定肾上腺髓质主要分泌肾上腺素(Ad或E)、去甲肾上腺素(NA或NE)及微量的多巴胺(DA)。在它们分子中都含有儿茶酚和乙胺的基本结构。故统称为儿茶酚胺。Ad主要由肾上腺髓质分泌,NA主要由交感神经末稍分泌,DA主要存在于脑内纹状体。第57页,共76页,2024年2月25日,星期天(一)儿茶酚胺的代谢1.合成:酪氨酸多巴多巴胺NAAd2.分解:主要酶是MAO和COMT。变肾上腺素变去甲肾上腺素Ad或NA香草扁桃酸(VMA)?3,4-二羟扁桃酸DA分解代谢的终产物是高香草酸(HVA)甲基化羟化脱羧羟化COMTMAOCOMTMAOMAO第58页,共76页,2024年2月25日,星期天(二)儿茶酚胺的代谢异常儿茶酚胺的代谢异常的主要疾病是嗜铬细胞瘤。嗜铬细胞瘤起源于由神经嵴中移行出来的嗜铬细胞。嗜铬组织能合成儿茶酚胺,在胚胎期分布广泛,出生后仅少量残留在肾上腺髓质、交感神经节和体内其他部位。可形成肿瘤并合成及释放儿茶酚胺。临床表现主要为高血压症候群,可为阵发行或持续性的高血压。病程长者可有左心室肥大、心力衰竭、冠状动脉硬化、肾小动脉硬化、脑出血、血栓形成等。病人基础代谢率增高,产热增多,体温升高。第59页,共76页,2024年2月25日,星期天(三)儿茶酚胺的测定测定样品是血清和尿,采血应在情绪稳定和安静状态下进行,2天前停止饮用兴奋性饮料。如:茶、咖啡等。1.血浆肾上腺素和去甲肾上腺素的测定常用方法荧光法、HPLC、放射酶学分析。乙二胺(EDA)法血浆中Ad和NA经氧化铝吸附,阳离子交换树脂纯化,在稀醋酸中Ad氧化成肾上腺素红,然后与EDA缩合、脱水、脱氢生成荧光物质。而NA
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