动物细胞工程.ppt

单克隆抗体的概念：由单个杂交瘤细胞进行无性繁殖,也就是通过克隆，形成细胞群，这一细胞群所产生的化学性质单一、特异性强的抗体称为单克隆抗体。第21页,共30页，2024年2月25日，星期天注射抗原B淋巴细胞骨髓瘤细胞细胞融合、筛选杂交瘤细胞细胞培养筛选，继续培养足够数量的、能产生特定抗体的细胞群体外培养注射到小鼠腹腔单克隆抗体第22页,共30页，2024年2月25日，星期天为什么不用两个而要用多个细胞进行动物细胞间的融合？就目前常用的细胞融合方法来看，不管是用物理的、化学的方法，还是生物的方法，其融合率都不可能是100%。仅用两个细胞融合，其效率太低，不一定能得到融合细胞。更重要的是，即使两个细胞已发生融合，但并不一定是研究者期望得到的细胞类型。目前动物细胞融合技术最有价值的应用就是单克隆抗体的制备。第23页,共30页，2024年2月25日，星期天我们以制备单克隆抗体为例来说明这一问题。我们知道，体内产生的特异性抗体种类可多达百万种以上，但是每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体，如果仅取一个脾细胞（含B淋巴细胞）和一个瘤细胞杂交，我们不能确定该脾细胞分泌的抗体是否正是我们所需要的；若用大量的脾细胞和瘤细胞进行融合，就可以从融合细胞中筛选出能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。第24页,共30页，2024年2月25日，星期天（三）单克隆抗体的应用与常规抗体相比，单克隆抗体特异性强，灵敏度高，并可大量制备。应用主要有：1、作为诊断试剂2、用于治疗疾病和运载药物准确、高效、简易、快速把抗癌细胞的单克隆抗体与药物相结合，制成“生物导弹”。第25页,共30页，2024年2月25日，星期天资料：目前世界各国已经研制出数以百计的单克隆抗体。许多缺乏良好诊断手段的传染病、免疫性疾病、血液病、内分泌疾病和遗传病，用单克隆抗体作为诊断手段，是一个必然趋势。另外，用单克隆抗体做体内诊断，借以鉴别和定位体内“病灶”也引起人们的注意，目前，主要用于肿瘤追踪及心肌梗塞的诊断。第26页,共30页，2024年2月25日，星期天思考与探究1.植物体细胞杂交技术与动物细胞融合技术有什么不同？植物体细胞杂交技术与动物细胞融合技术基本相同，不同的是植物体细胞融合前需去掉细胞壁，然后再融合；动物细胞融合是两个体细胞直接融合。第27页,共30页，2024年2月25日，星期天2.制备单克隆抗体时，为什么要选用B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞？哺乳动物感染抗原后，其体内会形成相应的B淋巴细胞，B淋巴细胞能分泌相应的抗体凝聚或杀死这些抗原。动物在免疫反应的过程中，每一种B淋巴细胞能分泌一种特异性抗体，要想获得大量的特异性抗体，必须使能分泌该单一抗体的B淋巴细胞大量增殖。B淋巴细胞具有产生单一抗体的能力，但不能在体外增殖；骨髓瘤细胞是一种癌细胞，它能在体外培养条件下无限增殖，但不能产生抗体。因此，把一种B淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行细胞融合，产生杂交瘤细胞，它会兼有两个亲本细胞的特性──在体外培养条件下能不断增殖，同时能产生出某种特异性的抗体。第28页,共30页，2024年2月25日，星期天1．在动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的是（）A．结果是相同的 B．杂种细胞的形成过程基本相同C．操作过程中酶的作用相同D．诱导融合的手段相同Ｂ第29页,共30页，2024年2月25日，星期天感谢大家观看第30页,共30页，2024年2月25日，星期天关于动物细胞工程课件植物体细胞杂交的意义：打破生殖隔离，克服远缘杂交不亲和的障碍，培育作物新品种。第2页,共30页，2024年2月25日，星期天一、动物细胞融合细胞融合是正常的生命活动。两个细胞正在融合受精作用第3页,共30页，2024年2月25日，星期天(一)动物细胞融合的概念动物细胞融合也称细胞杂交,是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。（二）动物细胞融合的过程与植物原生质体融合原理相同，方法类似。杂交细胞:融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞。第4页,共30页，2024年2月25日，星期天细胞A细胞B杂种细胞灭活的病毒物理法化学法第5页,共30页，2024年2月25日，星期天用灭活的病毒诱导动物细胞融合过程细胞核病毒颗粒细胞核第6页,共30页，2024年2月25日，星期天灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面细胞膜被病毒颗粒穿通细胞膜连接细胞融合，形成杂种细胞（细胞膜具有一定的流动性）第7页,共30页，2024年2月25日，星期天两个核的融合是在杂种细胞第一次有丝分裂时进行的