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为什么分离不同的微生物要采用不同的稀释度?测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量,选用的稀释范围相同吗?分析:土壤中各类微生物的数量(单位:株/kg)是不同的。例如在干旱土壤中的上层样本中:好氧及兼性厌氧细菌数约为2185万,放线菌数约为477万,霉菌数约为23.1万。1:为获得不同类型的微生物,就需要按不同的稀释度进行分离,同时还应当有针对性地提供选择培养的条件。第21页,共34页,2024年2月25日,星期天㈣.取样涂布◆实验时要对培养皿作好标记。注明培养基类型、培养时间、稀释度、培养物等。◆如果得到了2个或2个以上菌落数目在30——300的平板,则说明稀释操作比较成功,并能够进行菌落的计数,如果同一稀释倍数的三个重复的菌落数相差较大,表明试验不精确,需要重新实验。第22页,共34页,2024年2月25日,星期天㈤.微生物的培养与观察在菌落计数时,每隔24h统计一次菌落数目。选取菌落数目稳定时的记录作为结果,以防止因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目。培养不同微生物往往需要不同培养温度。细菌:30~37℃培养1~2d放线菌:25~28℃培养5~7d霉菌:25~28℃的温度下培养3~4d。第23页,共34页,2024年2月25日,星期天◆如果得到了2个或2个以上菌落数目在30——300的平板,则说明稀释操作比较成功,并能够进行菌落的计数,如果同一稀释倍数的三个重复的菌落数相差较大,表明试验不精确,需要重新实验。第24页,共34页,2024年2月25日,星期天微生物的培养与观察第25页,共34页,2024年2月25日,星期天三.结果分析与评价P251.通过对照实验,若培养物有杂菌污染,菌落数偏高;若培养物混入其他氮源,则菌落形态多样,菌落数偏高,难以选择出分解尿素的微生物。2.稀释操作是否成功:如果得到了2个或2个以上的菌落数在30—300的平板,则说明稀释操作成功。同一稀释倍数的三个重复组的菌落数不能相差悬殊,如相差较大,表示实验不精确,要重新实验。第26页,共34页,2024年2月25日,星期天四、操作提示无菌操作做好标记规划时间第27页,共34页,2024年2月25日,星期天五.课外延伸2、鉴定大肠杆菌的方法:在培养基中添加培养该细菌,如果出现菌落呈现,则说明有大肠杆菌。在以尿素为唯一氮源的培养基中加入指示剂。培养某种细菌后,如果PH升高,指示剂将变,说明该细菌能够分解尿素。酚红红1、鉴定分解尿素的细菌的方法伊红-美蓝黑色且有金属光泽第28页,共34页,2024年2月25日,星期天本课题知识小结:第29页,共34页,2024年2月25日,星期天1.使用选择培养基的目的是()A.培养细菌B.培养真菌C.使需要的微生物大量繁殖D.表现某微生物的特定性状与其他微生物加以区别2.能合成脲酶的微生物所需要的碳源和氮源分别是()A.CO2和N2B.葡萄糖和NH3C.CO2和尿素D.葡萄糖和尿素实践训练CD第30页,共34页,2024年2月25日,星期天3.下列说法不正确的是()A.科学家从70-80度热泉中分离到耐高温的TaqDNA聚合酶B.统计某一稀释度的5个平板的菌落数依次为M1、M2、M3、M4、M5,以M3作为该样品菌落数的估计值C.设置对照实验的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响,提高实验结果的可信度D.同其他生物环境相比,土壤中的微生物数量最大,种类最多。4.为培养和分离出酵母菌并淘汰杂菌,常在培养基中加入()A.较多的氮源物质B.较多的碳源物质 C.青霉素类药物D.高浓度食盐BC第31页,共34页,2024年2月25日,星期天5、下列叙述错误的是[]A.因为土壤中各类微生物的数量不同,所以为获得不同类型的微生物,要按不同的稀释倍数进行分离
B.测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量,选用的稀释范围不同
C.只有得到了3个或3个以上菌落数目在30—300的平板,才说明稀释操作比较成功,并能够进行菌落的计数
D.牛肉膏蛋白胨培养基的菌落数明显大于选择培养基的数目,说明选择培养基已筛选出一些细菌菌落C第32页,共34页,2024年2月25日,星期天根据细胞生存所需物质的种类和数量,用人工方法模拟合成的。合成培养基主要成分是氨基酸、维生素、碳水化合物、无机盐和其它一些辅助物质。
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