细菌分离培养和保存技术.ppt

培养箱1普通培养箱2二氧化碳培养箱3厌氧培养：厌氧袋、厌氧罐、厌氧盒、厌氧手套箱*1、进行平板划线（分区和连续划线）操作2、进行斜面培养基接种操作3、进行半固体培养基接种操作4、进行肉汤培养基接种操作四、实验内容*实验具体操作1、血平板、巧克力平板、中国蓝平板：四区划线法2、血平板：连续划线法3、克氏双糖：斜面接种法4、枸橼酸盐：斜面接种法5、半固体：穿刺接种法6、6.5%Nacl肉汤：液体接种法接种完毕后，置于普通培养箱中进行培养，37℃、18-24h后观察结果。*一、实验名称二、实验目的三、实验操作1、四区划线法：挑取单个大肠埃希菌菌落在血平板、巧克力平板及中国蓝平板上进行四区划线。（画图）2、连续划线法：取10μl大肠埃希菌菌悬液在血平板上进行连续划线。（画图）3、双糖斜面接种：挑取单个大肠埃希菌菌落进行接种4、枸橼酸盐斜面接种：挑取单个大肠埃希菌菌落进行接种5、半固体接种：挑取单个大肠埃希菌菌落进行穿刺接种6、6.5%Nacl肉汤接种：挑取单个粪肠球菌菌落进行研磨接种*实验报告填写培养基的配制：药敏平板配制调配成分溶解高压灭菌平板倾注质量控制实验*实验内容补充（下次实验课）*PowerBar中国专业PPT设计交流论坛作者:findygirl实验二细菌分离培养和保存技术苏州大学附属第二医院谢小芳*实验程序一、实验目的二、实验材料三、实验方法（一）接种与分离工具（二）接种与分离方法（三）细菌的培养方法四、实验内容*一、实验目的1、掌握细菌的分离培养和接种技术；2、掌握培养基的制备过程。*1、工具：接种环、接种针、移液器、酒精灯。2、培养基：（1）血平板、巧克力平板和中国蓝平板（2）双糖、半固体、枸橼酸盐、6.5%Nacl肉汤3、菌株：大肠埃希菌、粪肠球菌。4、恒温培养箱。二、实验材料*三、实验原理为了获得纯种的微生物，一般根据该微生物营养或培养特点，或对某种抑制剂的耐受性不同，或对某种环境条件要求不同，从而制作或设置一些选择性培养基，或选择性培养条件，再用稀释涂布平板法或稀释混合平板法或划线法分离，纯化该微生物，直至得到该纯种菌株。*接种与分离工具（1）接种环（2）接种针（3）涂布棒（4）无菌棉拭子（一）接种与分离工具*（二）培养基按性状可分为：固体培养基半固体培养基液体培养基培养基按用途可分为：基础培养基营养培养基选择培养基鉴别培养基厌氧培养基L型培养基*（三）接种与分离方法*1．平板划线分离法对混有多种细菌的临床标本，采用划线分离和培养，使原来混杂在一起的细菌沿划线在琼脂平板表面分离，得到分散的单个菌落，以获得纯种。平板划线分离法通常有两种方法：（1）分区划线分离法（2）连续划线分离法（二）接种与分离方法*（1）分区划线分离法：此法常用于含菌量较多的标本如痰、泌尿生殖道的分泌物和粪便或混合细菌的分离。划线时接种环与平皿约成30-40度角，轻轻接触，以腕力在琼脂表面轻快滑动，不能划破琼脂。第一次划线应占平皿面积的1/5，以后每次划线约占面积的1/4—1/5。划线为连续划线，不能间断应占满平皿，划线不能交叉重复。每次划完后接种环应灭菌。（二）接种与分离方法*分区划线分离法：（1）分区划线分离法：以四区划线最常用。实验一（二）接种与分离方法（2）连续划线分离法：此法常用于含菌量不多的标本或培养物中的细菌分离培养。方法是先将接种物在琼脂平板上1/5处轻轻涂抹，然后再用接种环或拭子在平板表面曲线连续划线接种，直至划满琼脂平板表面。

（二）接种与分离方法*（2）连续划线分离法：*1.为什