基于自组装铁蛋白纳米抗原颗粒及由其制备的猪瘟疫苗和应用[发明专利].pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局

(12)发明专利申请

(10)申请公布号CN112439057A

(43)申请公布日

2021.03.05

(21)申请号201910803838.7C12N15/866(2006.01)

(22)申请日2019.08.28

(71)申请人中国农业科学院生物技术研究所

地址100081北京市海淀区中关村南大街

12号中国农业科学院生物技术研究所

(72)发明人张志芳李轶女易咏竹刘兴健

胡小元魏珍珍宋浩志

(74)专利代理机构北京思元知识产权代理事务

所(普通合伙)11598

代理人余光军曾晖

(51)Int.Cl.

A61K39/187(2006.01)

A61P31/14(2006.01)

C07K19/00(2006.01)

C12N15/62(2006.01)权利要求书2页说明书21页

序列表3页附图1页

(54)发明名称

基于自组装铁蛋白纳米抗原颗粒及由其制

备的猪瘟疫苗和应用

(57)摘要

本发明公开了基于自组装铁蛋白纳米抗原

颗粒及由其制备的猪瘟疫苗和应用。本发明将猪

瘟病毒囊膜E2蛋白与自组装铁蛋白纳米颗粒亚

基融合得到融合蛋白。本发明将猪瘟病毒囊膜E2

蛋白进行单位点、双位点及多位点突变，所得到

的突变体的可溶性表达量和表达效率提升显著。

本发明利用原核表达系统、家蚕及AcMNPV-昆虫

细胞真核表达系统表达重组蛋白或通过重组杆

状病毒在脊椎动物体内进行基因呈递产生抗原

诱导抗体产生。本发明所提供的疫苗通过在幽门

螺杆菌铁蛋白笼形结构表面展示猪瘟病毒囊膜

AE2蛋白，引起广泛中和性抗猪瘟病毒抗体，提高

7了免疫效力还扩大了免疫范围，有成为具有交叉

5

0

9免疫效力的通用疫苗的潜力。

3

4

2

1

1

N

C

CN112439057A权利要求书1/2页

1.一种包含融合蛋白的纳米抗原颗粒，其特征在于，所述融合蛋白由猪瘟病毒囊膜E2

蛋白和单体铁蛋白亚基连接得到；优选的，所述融合蛋白由猪瘟病毒囊膜E2蛋白的C端和单

体铁蛋白亚基的N端通过连接肽SGG连接得到。

2.按照权利要求1所述的包含融合蛋白的纳米抗原颗粒，其特征在于，所述单体铁蛋白

亚基包括但不限于细菌铁蛋白、植物铁蛋白、藻铁蛋白、昆虫铁蛋白、真菌铁蛋白或哺乳动

物铁蛋白中的任何一种；优选的，所述单体铁蛋白亚基是幽门螺杆菌铁蛋白单体，其氨基酸

序列为NCBI上GenBank序列号为WP_000949190所示的氨基酸序列；

所述猪瘟病毒囊膜E2蛋白是猪瘟病毒完整E2蛋白序列；优选的，所述的猪瘟病毒囊膜

E2蛋白的氨基酸序列为NCBI上Genbank序列号为ART84247.1所示的氨基酸序列。

3.权利要求1所述融合蛋白的同感序列，其特征在于，其氨基酸序列为SEQ

ID

NO.1所

示，其编码基因的核苷酸序列为SEQ

ID

NO.2所示。

4.权利要求3所述的同感序列的优化基因，其特征在于，其核苷酸序列为SEQ

ID

NO.3

所示。

5.权利要求3所述融合蛋白的同感序列的突变体，其特征在于，将SEQ

ID

NO.1所示的

氨基酸按照I13H、G23M、N35A、S48K、L59N、Y66C、S78T、D86R、D97