4第四章--免疫球蛋白.ppt

IgG仅有单体形式，是人体含量最高的免疫球蛋白，在体内分布广泛，可以通过胎盘传递给胎儿。IgG在再次免疫应答中产生，亲和力高，半衰期长，可活化补体，是很强的调理素。四、IgGIgE的分子量为190kDa，仅有单体形式，主要由呼吸道和肠道上皮下的浆细胞分泌，与组织细胞结合。肥大细胞有Fc?RI，结合IgE，当抗原与这些IgE结合后会导致肥大细胞释放大量的炎性介质和趋化因子，募集补体和吞噬细胞来清除病原体，也可导致I型变态反应的发生。五、IgE第五节人工制备抗体一、多克隆抗体的制备二、单克隆抗体的制备三、基因工程抗体的制备以抗原直接免疫动物获得抗血清（antiserum），这是制备多克隆抗体的主要方法。多克隆抗体是由针对不同抗原表位的抗体组成的混合物。一、多克隆抗体的制备将分泌抗原特异性抗体但短寿的浆细胞与无抗原特异性但长寿的骨髓瘤细胞融合，建立可分泌针对该抗原的均质的高特异性抗体——单克隆抗体的杂交瘤细胞（hybridoma）。单克隆抗体在结构和组成上高度均一，抗原特异性及同种型一致，易于体外大量制备和纯化，纯度高、特异性强、效价高、少或无交叉反应，已广泛应用于疾病的诊断、治疗和生物导向药物的研制。二、单克隆抗体的制备基因工程抗体（geneticengineeringantibody）技术一方面可将鼠源抗体人源化或者直接制备人抗体，另一方面可对抗体的功能加以改进，使之更好的用于临床治疗。包括人-鼠嵌合抗体（chimericantibody）、改型抗体（reshapedantibody）、双特异性抗体（bispecificantibody）、小分子抗体等。三、基因工程抗体的制备*一、Ig单体由两条重链和两条轻链组成二、Ig的重、轻链由可变区和恒定区结构域组成三、J链是Ig形成多聚体的重要结构成分四、分泌片是分泌型Ig的组成成分所有Ig的单体均由一分子量约为50kDa的称之为重链和另一分子量约为25kDa称之为轻链的两种肽链组成。每一个天然的Ig单体都由两条重链和两条轻链组成，重链之间和重、轻链之间由二硫键连接，形成四肽链结构。一、Ig单体由两条重链和两条轻链组成由450~550个氨基酸残基组成，分子量约50~75kDa。分为?、?、?、?和?链，据此可将免疫球蛋白分为五类（class）或五个同种型（isotype），即IgM、IgD、IgG、IgA和IgE。（一）重链含约210个氨基酸残基，分子量约25kDa。分为?和?链两种，据此可将Ig分为?和?两型（type）。（二）轻链免疫球蛋白轻链和重链中氨基酸序列变化较大的区域。分别占重链和轻链的1/4和1/2。二、Ig的重、轻链由可变区和恒定区结构域组成（一）可变区（variableregion，V）免疫球蛋白轻链和重链中氨基酸序列较保守的区域。其位于肽段的羧基端，分别占重链和轻链的3/4和1/2。（二）恒定区（constantregion，C）重链和轻链V区（VH和VL）中氨基酸组成和排列顺序高度可变的3个区域。（三）高变区（hypervariableregion，HVR）或互补决定区（complementaritydeterminingregion，CDR）Ig的Y形两臂并非是僵硬的。IgA，IgG和IgD重链的CH1和CH2两个结构域之间的结构，由一或数个二硫键连接，富含脯氨酸而易伸展弯曲，能改变两个Y形臂之间的距离。（四）铰链区（hingeregion）用木瓜蛋白酶和胃蛋白酶可将Ig从铰链区切割成相应片段。木瓜蛋白酶裂解IgG而成的，含有抗原结合活性的片段称为Fab；不含抗原结合活性但易形成晶体的裂解片段，称为Fc段。胃蛋白酶裂解IgG可获F（ab）2片段。（五）酶切片段Ig重、轻链多肽链折叠而成的球形结构，也称免疫球蛋白折叠（immunoglobulinfold，Ig折叠）。每个结构域大小相似的，约含110氨基酸。（六）结构域（domain）Ig结构域中的保守氨基酸序列不仅存在于Ig中，免疫系统中的许多其他蛋白质如T细胞的抗原受体、CD4、CD8、Fc受体、一些细胞因子及其受体以及一些非免疫系统的分子也存在着结构同源的保守序列，并形成Ig折叠，从而提示这些分子是由共同的祖先基因进化而来的。（七）免疫球蛋白超家族（immunoglobulinsuperfamily，IgSF）J链（Jchain）是一富含半胱氨酸的多肽链，由浆细胞合成，主要功能是将单体Ig分子连接为多聚体。IgA二聚体和IgM五聚体均含J链；IgG、IgD和IgE常为单体无J链。三、J链是Ig形成多聚体的重要结构成分分泌片（secretorypiece，