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TACI-Fc及配体BAFF的表达，纯化和活性研究开题报告

题目：TACI-Fc及配体BAFF的表达，纯化和活性研究

摘要：

TACI（Transmembraneactivatorandcalciummodulatorandcyclophilinligandinteractor）是一种TNF受体家族的成员，它能与两种配体BAFF（B-cellactivatingfactor）和APRIL（aproliferation-inducingligand）结合，并参与淋巴细胞免疫反应的调节。本研究旨在构建TACI-Fc融合蛋白，并通过纯化和活性研究，探究其对BAFF的结合能力及生物学功能。

方法：

1.TACI-Fc的构建

PCR扩增获取TACI基因序列，并克隆到表达载体pFUSE-Fc2中，构建TACI-Fc融合蛋白。

2.TACI-Fc的表达和纯化

将TACI-Fc重组蛋白转染HEK293T细胞，收集细胞培养上清，通过Histag亲和层析和蛋白A层析纯化获得TACI-Fc重组蛋白。

3.TACI-Fc的活性研究

将不同浓度的TACI-Fc与定量的BAFF结合，通过ELISA法检测TACI-Fc对BAFF的结合亲和力。进一步探究TACI-Fc对淋巴细胞增殖和分化的影响。

预期结果：

成功构建TACI-Fc融合蛋白，经过Histag亲和层析和蛋白A层析纯化，获得纯度高的TACI-Fc重组蛋白。活性研究表明，TACI-Fc具有与BAFF结合的能力，并可影响淋巴细胞的增殖和分化。这些结果将有助于深入探究TACI-Fc在免疫调节中的作用。