布鲁氏菌外膜蛋白的原核表达和鉴定.pdfVIP

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01单击添加目录项标题02

03材料与方法04

01

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02

引言

布鲁氏菌概述

布鲁氏菌的分类与特点

布鲁氏菌的感染途径与症状

布鲁氏菌的流行病学与危害

外膜蛋白在布鲁氏菌中的作用

帮助细菌入侵人体细胞

诱发人体免疫反应

充当细菌之间的交流媒介

原核表达在生物技术领域的应用

重组蛋白的生产突变体的构建

异源蛋白的生产

03

材料与方法

实验材料

菌株：布鲁氏菌标准株或临床分试剂：用于DNA提取、PCR扩增、

离株酶切和连接的试剂

培养基：选择适合布鲁氏菌生长

实验方法

菌株选择：选择布鲁氏菌标准株或临床分

离株筛选阳性克隆

培养基制备：制备适合布鲁氏菌生长的培

养基得目的蛋白

实验步骤

构建重组质粒转化大肠杆菌诱导表达外膜蛋白

04

结果与分析

布鲁氏菌外膜蛋白的表达

表达产物检测：通过Westernblot

表达产物的鉴定

目的：确定表达产物是否为目标结果：表达产物能够与目标蛋白

蛋白的特异性抗体发生反应，说明表

达产物为目标蛋白

方法：采用Westernblot和

ELISA

表达产物的生物活性分析

表达产物的纯度表达产物的活性表达产物的抗血

鉴定检测清反应

05

讨论与结论

结果讨论

表达产物的纯度和鉴定结果

表达产物的免疫原性分析

结论总结

成功表达了布鲁氏菌外膜蛋白

获得了纯化蛋白

验证了蛋白的免疫原性

未来研究方向

进一步优化外膜蛋白的表深入研究外膜蛋白的免疫探索外膜蛋白在疫苗研发