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分子生物学在生药学上的应用
分子生物学是从分子水平探讨生命现象及其规律的一门学科。近年来在农
林、医药、环境监测与石油、化工等方面得以广泛应用,特别是基因工程药物的
产生、转基因动物的研制成功、基因疗法的临床应用等已取得显著成就,分子生
物学已渗透到现代生命科学的各个方面。如何利用分子生物学的理论和技术来发
展中医药,是摆在中医药工作者面前的一个严峻问题。近年来,在中医药界人士
的共同努力下,已将分子生物学技术引入到中医中药的研究上来,从基因和分子
水平研究中医的基础理论、疾病的本质和中药的作用,取得了可喜的成绩,具体
体现在以下几方面。
1中医临床与分子生物学
人类不论是器质性疾病还是功能性疾病,都可以从基因上去探究病因,寻找
防治方法,编制各种疾病的基因表达谱,从诊断上便于基因检测;对疾病的治疗,
不管在现在还是在将来,都将从调控基因的功能着手,即从修饰或改变基因的表
达与基因产物的功能着手,而不是以改变与纠正基因的结果为主要手段。目前中
医临床主要通过中药对疾病相关基因的干预和调控作用来探讨中药的作用分子
[1]
机理与作用靶点。谢雁明应用cDNAarray技术分析骨碎补总黄酮对去卵巢大鼠
基因水平的影响。方法为制作去卵巢大鼠模型,24周后,活杀动物,腹主动脉取
血6ml,并取出脊髓4cm,抽提totalRNA分离mRNA进行检测。结果为空白对照
组血样与模型组的差异为个基因,空白对照组与骨碎补总黄酮组的差异为个基
因。骨碎补总黄酮灌服后大鼠模型基因过度表达基本恢复正常。该实验珑分析中
脊髓基因基本无差异。结论为骨碎补总黄酮灌服6个月后大鼠模型基因过度表达
能基本恢复正常。表明骨碎补总黄酮对去卵巢大鼠基因表达水平有一定的影响。
[2]
杨秀芬等研究三七对大鼠肺组织内细胞色素P450(cytochromeP450,CYP)和谷
胱甘肽S-转移酶(glutathioneStransferase,GST)基因表达的影响。雄性SD大鼠,
三七2.4g/kg,每日1次连续灌胃14d,用逆转录-实时定量PCR法检测肺组织内的
CYP1A1,CYP1A2,CYP1B1,CYP2B1,CYP2E1,CYP3A1,CYP4A1基因和
谷胱甘肽-S转移酶GST-m1GST-pi基因的表达情况。与空白组相比,三七不影响
肺组织内CYP2E1,CYP1A2和GST-pi基因的表达,但2g/kg的三七可诱导CYP3A1
基因的表达(4.00倍,P0.05),2,4g/kg的三七可分别诱导GST-m1基因的表达(分
别是1.64倍,P0.05和1153倍,P0.05)和CYP1A1基因的表达(3.44倍,P0.05和
6.05倍,P0.05),2,4g/kg的三七对CYP1B1基因(0.81倍,P0.05和0.38倍,P0.05)
有抑制趋势;2,4g/kg的三七明显抑制CYP2B1基因(0.47倍,P0.05和0.50倍,
P0.05)和CYP4A1基因(0.54倍,P0.05和0.72倍,P0.05)的表达。三七对肺组织
不同的CYP基因和不同的GST基因的影响有明显的差异,这对临床合理使用三七
[3]
和研究三七的作用机制具有重要意义。武建胜等探讨高血压的神经免疫调节机
制和滋阴潜阳方对高血压大鼠淋巴细胞内信号转导作用的可能环节。采用免疫组
-1-
织化学染色法和DP801图像分析系统检测“二肾一夹”高血压大鼠淋巴细胞内蛋
白激酶A(PKA)蛋白表达。采用放射免疫法检测环磷酸腺苷(cAMP)水平的改变。
模型组大鼠淋巴细胞内PKA蛋白表达和cAMP水平明显增强,滋阴潜阳组对此有
抑制作用。滋阴潜阳方抑制淋巴细胞内PKA蛋白表达和cAMP水平可能是其发挥
[4]
神经免疫调节作用的机制之一。王振义研究发现砷剂可促进急性促幼粒细胞白
血病(APC)细胞株NB4细胞凋亡进一步研究发现ASO对bcl-2基因的表达,无论
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从mRNA还是从蛋白水平,都具下调作用,而bax、bcl-x、c-myc
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