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汇报人:
PARTONE
PARTTWO
l目的:筛选出具有抗乙肝表面抗原活性的单域抗体
l方法:利用基因工程技术,将条纹斑竹鲨抗体基因与噬菌体展示载体进行融合表达
l流程:抗体基因的克隆、筛选与鉴定、噬菌体抗体库的构建、抗体的筛选与鉴定
筛选条件:根据抗原的特性选择合适的筛选条件,如亲和层析、免疫沉
淀等。
筛选策略:采用多种筛选策略,如单克隆抗体技术、噬菌体展示技术等,
以提高筛选效率和准确性。
筛选流程:包括免疫、杂交瘤细胞融合、抗体筛选和抗体鉴定等步骤,
确保筛选出的抗体具有高特异性和亲和力。
筛选方法:通过基因工程技术对条纹斑竹鲨抗体进行筛选
筛选过程:从条纹斑竹鲨免疫血清中获得单域抗体
筛选结果:成功获得具有抗乙肝表面抗原活性的单域抗体
筛选方法:通过基因工优化策略:采用亲和实验验证:通过抗原
程技术,从条纹斑竹鲨
力成熟和链更换技术,-抗体反应实验,验
的抗体库中筛选出具有
进一步提高筛选出的证筛选出的单域抗体
抗乙肝表面抗原活性的
单域抗体单域抗体的亲和力的特异性及活性
PARTTHREE
目的基因的获载体构建:将转化宿主细胞:
取:从条纹斑目的基因与表将重组载体导
竹鲨抗乙肝表
达载体连接,入宿主细胞,
面抗原单域抗
构建重组载体进行表达
体中克隆出目
目的:将抗体方法:选择合载体构建:将
的基因插入到适的表达载体,抗体的基因插
表达载体中,如质粒或病毒入到表达载体
使其在宿主细载体的启动子和终
重组抗体的基因克隆与鉴定
表达载体构建与转化
重组抗体表达条件优化
目的:通过纯化技术去除重组抗体中的杂质,提高抗体的纯度和活性
方法:采用离子交换层析、凝胶过滤层析等技术进行纯化
鉴定:通过SDS电泳、Westernblot等技术对纯化后的抗体进行鉴定
PARTFOUR
l实验方法:采用ELISA等方法检测重组抗体与乙肝表面抗原的结合活性。
l实验结果:重组抗体与乙肝表面抗原具有较高的亲和力,结合活性较强。
l
重组抗体与乙抑制乙肝病毒重组抗体可诱
肝病毒结合,的吸附和侵入,导乙肝病毒的
阻断病毒与宿降低感染风险免疫应答,增
主细胞结合强机体免疫力
目的:评估重组抗体诱导免疫反应的能力
方法:通过动物实验,观察重组抗体对免疫系统的影响
结果:重组抗体能够诱导产生特异性抗体,增强免疫应答
PARTFIVE
重组抗体能够重组抗体可以过基因工程技
特异结合乙肝作为诊断试剂,术,重组抗体可
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