黄连中盐酸小檗碱的提取分离及鉴定.docx

吉林化工学院

化工与材料工程学院

综合与设计性化学实验

实验类型 ： 设计

实验题目：黄连中盐酸小檗碱的提取分离及鉴定

班 级： 学 号：

姓 名： 实验日期： 2010.11.12

实验题目：黄连中盐酸小檗碱的提取分离及鉴定

前言

黄连为毛茛科黄连属植物黄连（coptischinensisEraneh）、三角叶黄连（coptisdeltoidcaC．YchengetHsiao）或云连（coptiteetoidesC.Y.cheng）的干燥根茎。

黄连具有清热燥湿、清心除烦，泻火解毒的功效。

黄连的有效成分主要是生物碱，已分离出的主要生物碱有小檗碱（berberine）、掌叶防己碱（palmatine）、黄连碱（jatrorrhizine）等。其中小檗碱含量最高，可达10%左右，是以盐酸盐的状态存在于黄连中。小檗碱有很强的抗菌作用，已广泛地应用于临床，掌叶防己碱也作药用，其抗菌性能和小檗碱相似。

一、实验目的

学习和掌握水溶性生物碱的提取方法。

学习和掌握生物碱的柱色谱分离方法。

学习和掌握生物碱的化学检识及薄层色谱的鉴定方法。

二、实验原理

小檗碱为黄色针状结晶，mp为145℃，游离的小檗碱能缓缓溶于水（1：20）及乙醇中（1：100），易溶于热水及热醇，难溶于乙醚，石油醚、苯、三氯甲烷等有机溶剂，其盐在水中溶解度很小，尤其是盐酸盐。盐酸盐为l：500，枸橼酸盐1：125，酸性硫酸盐1：100，硫酸盐l：30，但在热水中都比较容易溶解。

小檗碱常以季铵碱形式存在，碱性强（pka11.53），能溶于水中，其水溶液有三种互变形式。

O

O

OON

O

O

NOH

O

O

OCH

N

OH

OCH

NH

CHO

OCH

OCH

OCH

OCH

季铵式（红棕色）

醇式（黄色）

醛式（黄色）

O

O

N+

N+

OCH

3

小檗碱（黄连素）

OCH

3

本实验是利用小檗碱和掌叶防己碱的硫酸盐在水中溶解度大的性质，用硫酸水提取出来总生物碱，再利用其盐酸盐难溶于水及盐析作用，使生物碱盐析出，以除去水溶性杂质。再利用两种生物碱极性不同，采用柱色谱分离。

三、仪器与试剂

仪器与材料

100mL园底烧瓶、冷凝管、50mL、100mL烧杯各1只，10mL、25mL量筒各1个，铁架台1个、漏斗1个、滤纸若干、滴管1个、蒸发皿、小试管三支等。

试剂与原料

黄连粉2.0g，体积分数为95%的乙醇15mL，浓HCl10mL、蒸馏水、碘化铋钾试液、碘碘化钾试液、硅钨酸试液等。

四、实验步骤

40ml95%乙醇

小檗碱的提取： 取4.0g黄连粉末――――――――→加热（水浴）回流 1.5h

100ml 圆底烧瓶

（75~85℃）―――→放置 15min―――→过滤，浓缩―――→蒸发皿中蒸干至红色糖浆状（水浴加热）―――→1%醋酸35ml，加热溶解―――→过滤除去不溶物―――

→滤液放置10min，滴加浓Hcl至溶液浑浊(PH=1)，放置冷却即小檗碱结晶析出―――

→过滤，精制（用水洗涤结晶 2―3，即得小檗碱精制品）

鉴别：标号1，2，3 加2―3ml 含小檗碱的溶液，分别滴加碘化铋钾，碘―

碘化钾，硅钨酸 2―3滴。观察：

刚加入时，颜色从…变为…，是否有沉淀。

振荡，观察现象。

五、实验记录

鉴定次数

第一次

第二次

第三次

加入试剂

碘化铋钾

碘碘化钾

硅酸铅

前

橘红色

棕红色，有沉淀

浅黄色，有沉淀

后

少量沉淀

絮状沉淀

大量沉淀

六、实验讨论

1盐酸小檗碱在热水、热乙醇中溶解度较大，在冷水、冷乙醇中溶解度小，加入NaCl可以促进其析出结晶，且NaCl用量10%（W/V）最为理想。

本实验采用正交实验设计，乙醇回流提取法提取黄连中盐酸小檗碱的最佳提取工艺为：50%乙醇，8倍体积，75~85℃回流提取1.5h。

荧光分析法灵敏度高，选择性好，但易受外界因素（如温度等）影响，因此标准曲线的获得及各提取物含量测定工作在一次完成，数据更为可信。

盐酸小檗碱层析洗脱后要迅速抽滤，否则样品损失严重。

盐酸小檗碱的提取方法较多，但本人认为回流法较其他方法设备简单，

耗时较短，成本低，提取率高，可以适用于生产及药学专业学生实习采用。

八、参考文献

【1】基础化学实验教程（Ⅱ）吉林化工学院基础化学实验教学中心编

【2】分析化学（第五版）武汉大学主编

【3】实验设计与数据处理 罗传义时景荣编著 吉林科学技术出版社

【4】晁若冰，张浩，庄燕黎，等.高效液相色谱法测定黄连药材中小檗碱型生物碱的含量

［J］.药物分析杂志，2003，23(5)：354.

【5】分析化学实验