种子生活力测定—四唑染色测定方法试剂的配制和仪器用具.pptx

四唑测定的仪器用具

一、电热恒温箱

主要用于加速四唑染色反应，

要求能准确控制20~40℃的恒温范围。

二、变温发芽箱

主要用于加速种子预湿和培养，要求从5~40℃的温度范围。

三、冰箱

可选用普通家用冰箱，主要用于中断或延缓四唑测定时间，要求保持1~2℃温度。

四、电子天平

配制试剂时使用。

五、种子切割工具

解剖刀或刀片、解剖针、切割垫板，主要用于割破种皮、切开种皮和种子，或穿刺种子。

六、种子预湿用具

种子预湿需要纸、毛巾、烧杯等器具。

七、种子染色用具

有盖的不同规格的染色盘、棕色加液器、镊子、吸管等。

八、观察器具

体视显微镜或放大镜，以及保护器具如手套、眼睛保护镜、废液处理容器等。

八、观察器具

体视显微镜或放大镜，以及保护器具如手套、眼睛保护镜、废液处理容器等。

四唑测定的化学试剂

一、四唑染色溶液

四唑染色通常使用浓度为0.1%～1.0%的四唑溶液，一般切开胚的种子可用0.1%～0.5%浓度的四唑溶液；整胚、整粒种子或斜切、横切或穿刺的种子需用1.0%浓度的四唑溶液。

一、四唑染色溶液

称量

定容

溶解

二、磷酸缓冲液

四唑溶液的pH值必须在6.5～7.5范围之内。一般采用磷酸缓冲液来配制。

首先配好两种母液Ⅰ和母液Ⅱ，然后取母液Ⅰ2份和母液Ⅱ3份混合即成。

二、磷酸缓冲液

1、母液Ⅰ

称取9.078gKH2PO4溶解于l000mL的蒸馏水中。

二、磷酸缓冲液

2、母液Ⅱ

为称取9.472gNa2HPO4或11.876gNa2HPO4·2H2O于l000mL的蒸馏水之中。

三、乳酸苯酚透明液

采用乳酸苯酚透明液，是使小粒豆类和牧草种子经四唑染色后使种皮、稃壳或胚乳变为透明，以便透过这些部分清楚地观察其胚主要构造的染色情况。

三、乳酸苯酚透明液

乳酸苯酚透明液配制

取乳酸20mL、苯酚20mL、40mL甘油和20mL水混合而成。

该药液有毒性，在使用时谨防触及皮肤或衣服等，配制时最好戴好树胶薄膜手套，并在通风橱里操作。

四、过氧化氢溶液

用于某些牧草种子，如黑麦草和早熟禾等的预湿浸种，以加快酶的活化和吸胀。

一般应用0.3%浓度的溶液。