植物组织培养基的配制（植物组织培养技术课件）.pptx

;1;1;一、培养基的分类;1;二、培养基的成分;（一）水分

水是植物原生质体的组成成分，也是一切代谢过程的介质和溶媒。

;水分类型：蒸馏水、自来水、纯水等

选择：研究上，通常用蒸馏水；

生产上，可用高质量自来水。;（二）无机盐类;大量元素：碳、氢、氧、氮、磷、钾、钙、镁、硫;磷：磷脂的主要成分，而磷脂又是原生质体、细胞核的重要组成成分。

常用的物质有磷酸二氢钾或磷酸氢二钾等。

钾：调节细胞渗透压，同时是植物体内多种酶的活化剂。

制备培养基时，常以氯化钾、硝酸钾等盐类提供。钾促植物生长健壮，增强抗性，茎秆挺拔。

;钙：是构成细胞壁的一种成分，钙促进幼根生长。

常以CaCl2·2H20提供。

镁：镁影响酶的活性，并决定新陈代谢过程。

硫：硫是含硫氨基酸和蛋白质的组成成分。

它们常以MgS04·7H20提供。;微量元素：主要有铁、锰、锌、铜、硼、碘、钼、钴;铁:

铁是一些氧化酶、细胞色素氧化酶、过氧化氢酶等的组成成分。同时，它又是叶绿素形成的必要条件。微量元素中，铁的使用量最大。

在制做培养基时用FeS04·7H20和Na2-EDTA（乙二胺四乙酸二钠）结合成螯合物使用。;锰：参与植物的光合、呼吸代谢过程，影响根系生长。

锌：是各种酶的构成要素，能增强光合作用效率，参与生长

素的代谢，促进生殖器官发育和提高抗逆性。

铜：有促进离体根生长的作用。

硼：能促进生长器官的正常发育，参与蛋白质合成或糖类运输。

钼：参与氮素代谢

;（三）、有机营养成分;维生素

主要有盐酸硫胺素（VB1）、盐酸吡哆醇(VB6)、烟酸（VB3）、抗坏血酸（VC）、泛酸钙、生物素（VB7）、叶酸（VB11）、钴胺素、VB2等。一般用量为0.1～1.0mg／L。

有时用量较高。其中盐酸硫胺素可全面促进植物生长；抗坏血酸有抗氧化功能，防止褐变；盐酸吡哆醇能促进根的生长。Vc有防止组织变褐的作用。

维生素具有热易变性，易在高温下降解，可进行过滤灭菌;肌醇

使用浓度一般为l00mg／L，适当使用肌醇，能促进愈伤组织的生长以及胚状体和芽的形成。对组织和细胞的繁殖、分化有促进作用，对细胞壁的形成也有作用。

;氨基酸

是很好的有机氮源，是蛋白质的组成成分，可直接被细胞吸收利用，对外植体的芽、根、胚状体的生长、分化均有良好的促进作用。

培养基中最常用的氨基酸是甘氨酸，其他的如精氨酸、谷氨酸、谷酰胺、天冬氨酸、天冬酰胺、丙氨酸等也常用。

有时应用水解乳蛋白或水解酪蛋白，它们是含有约20种氨基酸的混合物，用量在10～1000mg／L之间。由于它们营养丰富，极易引起污染。

;天然有机添加物

其成分比较复杂，大多含氨基酸、激素、酶等一些复杂化合物。它对细胞和组织的增殖与分化有明显的促进作用，但对器官的分化作用不明显。

主要有椰乳、酵母提取液、马铃薯、香蕉汁、番茄汁等

;椰乳：在愈伤组织和细胞培养中作用明细，一般使用浓度为10-20%;香蕉汁

;马铃薯

;（四）、生长调节物质;生长素类

;细胞分裂素类;赤霉素GA;（五）、糖类;（六）、介质或载体;（七）、其他物质;1;三、基本培养基的类型;2、硝酸钾含量较高的培养基

;3、无机盐含量中等的培养基;4、无机盐低含量的培养基

;母液配制;一、蝴蝶兰简介;一、母液的概念及配制母液的意义;二、母液配制（以MS铁盐为例）;计算：母液各成分称取量=培养基配方用量（mg/L）*浓缩倍数*所配制母液体积(L)

;计算：;;;;;;培养基的配制;培养基（medium）;;冷灌装;吸取母液;定容、混匀;调整PH值至5.8;分装、密封;灭菌（温度121℃，时间20min）;;;;;分化：1/2MS+2.5mg/L6-BA+0.2mg/LNAA+20g/L白糖+4g/L琼脂

;分化：1/2MS+2.5mg/L6-BA+0.2mg/LNAA+20g/L白糖+4g/L琼脂500ml，每瓶分50ml，ph6.0

;壮苗：2/3MS+1g/L活性炭+22g/L白糖+4g/L琼脂500ml，每瓶分50ml，ph6.0

;壮苗：2/3MS+1g/L活性炭+22g/L白糖+4g/L琼脂500ml，每瓶分50ml，ph6.0

;生根：1/2MS+1g/L活性炭+0.1mg/LNAA+18g/L白糖+4g/L琼脂

500ml，每瓶分50ml，ph6.0

;生根：1/2MS+1g/L活性炭+0.1mg/LNAA+18g/L白糖+4g/L琼脂

500ml，每瓶分50ml，ph6.0