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基因工程课程综述
班级:11生物技术学号:1102021044姓名:赵贺志
摘要:从20世70年代初发展起来的基因工程技术,经过30多年来的进
步与发展,已成为生物技术的核心内容。没有人可以否认,DNA重组技术将成
为21世纪最重要的学科。
关键词:基因工程操作步骤应用
1974年,波兰遗传学家斯吉巴尔斯基(WaclawSzybalski)称基因重组技
术为合成生物学概念,1978年,诺贝尔生医奖颁给发现DNA限制酶的纳森斯
(DanielNathans)、亚伯(WernerArber)与史密斯(HamiltonSmith)时,
斯吉巴尔斯基在《基因》期刊中写道:限制酶将带领我们进入合成生物学的新
时代。2000年,国际上重新提出合成生物学概念,并定义为基于系统生物学原
理的基因工程。
基因工程(geneticengineering)又称DNA重组技术,是指将一种或多种
生物体的基因与载体在体外进行拼接重组,然后转入另一种生物体内,使之按
照人们的意愿稳定的遗传并表达出新的产物或新性状的DNA体外操作程序,也
称之为分支克隆技术。因此,供体、受体、载体是重组DNA技术的三大基本元
件。
广义上包括传统遗传操作中的杂交技术、现代遗传操作中的基因工程和细
胞工程。是指DNA重组技术的产业化设计与应用,包括上游技术和下游技术两
大组成部分。上游技术:基因重组、克隆和表达的设计与构建(即DNA重组技
术):下游技术:基因工程菌(细胞)的大规模培养、外源基因表达产物的分
离纯化过程。上游重组DNA的设计必须以简化下游操作工艺和装备为指导思想;
下游过程则是上游重组蓝图的体现与保证。基因工程产业化的基本原则。
基因工程是指重组DNA技术的产业化设计与应用,包括上游技术和下游技
术两大组成部分。上游技术指的是基因重组、克隆和表达的设计与构建(即重
组DNA技术);而下游技术则涉及到基因工程菌或细胞或基因工程生物体的大规
模培养以及基因产物的分离纯化过程。
基因工程的特征包括跨物种性和无性扩增。前者指外源基因到另一种不同
的生物细胞内进行繁殖。后者指外源DNA在宿主细胞内可大量扩增和高水平表
达。
基因工程的理论基础包括DNA是遗传物质、DNA双螺旋结构和“中心法则”
以及遗传密码。技术突破包括:限制性核酸内切酶、DNA连接酶、载体、感受
态体系、琼脂糖凝胶电泳和DNA测序技术。
基因工程的操作步骤:
1.提取目的基因:获取目的基因是实施基因工程的第一步。其中主要有两
条途径:一条是从供体细胞的DNA中直接分离基因;另一条是人工合成基因。
2.目的基因与运载体结合
基因表达载体的构建(即目的基因与运载体结合)是实施基因工程的第二
步,也是基因工程的核心。
3.将目的基因导入受体细胞
将目的基因导入受体细胞是实施基因工程的第三步。目的基因的片段与运
载体在生物体外连接形成重组DNA分子后,下一步是将重组DNA分子引入受体
细胞中进行扩增。
4.目的基因的检测和表达
目的基因导入受体细胞后,是否可以稳定维持和表达其遗传特性,只有通
过检测与鉴定才能知道。
基因工程的应用:
一、基因工程在农牧业、食品工业上的应用
运用基因工程技术,不但可以培养优质、高产、抗性好的农作物及畜、禽
新品种,还可以培养出具有特殊用途的动、植物。例如:转基因鱼、转基因牛、
转黄瓜抗青枯病基因的甜椒、转鱼抗寒基因的番茄、抗虫棉。
二、基因工程在环境保护中的应用
(1)环境监测:基因工程做成的DNA探针能够十分灵敏地检测环境中的病
毒、细菌等污染。
(2)环境污染净化——生物降解:利用基因工程培育的指示生物能十分灵
敏地反映环境污染的情况,却不易因环境污染而大量死亡,甚至还可以吸收和
转化污染物。
三、基因工程在医学上的应用
基因治疗最初是针对单基因缺陷的遗传疾病,目的在于有一个正常的基因
来代替缺陷基因或者来补救缺陷基因的致病因素。
用基因治病是把功能基因导入病人体内使之表达,并因表达产物——蛋白
质发挥了功能使疾病得以治疗。基因治疗的结果就像给基因做了一次手术,治
病治根,所以有人又把它形容为“分子外科”。
我们可以将基因治疗分为性细胞基
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