植物生理学实验4叶绿体色素的提取、分离及理化性质(纸层析法).ppt

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韩山师范学院生物系

植物生理学实验;实验原理;实验目的;植物材料:菠菜叶片

实验器材:试管25ml量筒、软木塞、台式天平、研钵、10ml量筒、试管、酒精灯、毛细滴管、滤纸、剪刀(自备)。

实验试剂:丙酮、碳酸钙、石英砂、四氯化碳、无水硫酸钠、浓盐酸、醋酸铜晶体。;称取新鲜菠菜叶片2g,剪碎放入研钵中,加入丙酮5ml、少许CaCO3(中和细胞中的酸防止Mg2+从叶绿素中心释放)和石英砂,研磨成匀浆,再加入适量的丙酮(5ml),然后用漏斗过滤,即得叶绿体色素液。

注意:叶绿体色素液各组做一份,共用。;准备滤纸条:长×宽=14×1cm。一端剪成窄条:长1.5cm,宽0.5cm

用毛细管(可用移液枪枪头)吸取叶绿体色素提取液点于滤纸的下端窄条上方约1cm处的中央,如色素过淡,用电吹风吹干后再重复4-5次(事先用铅笔在靠窄条的滤纸端约1cm处画一横线,色素液滴于横线处,并用吹风机吹干)。

在量筒中加入四氯化碳3-5毫升及少量硫酸钠,将滤纸悬于塞子上。扦入试管,使窄端浸入溶剂中,立于暗处层析0.5-1小时后观察分层现象。

注意:要求每个同学做一份。;胡萝卜素

叶黄素

叶绿素a

叶绿素b;叶绿素提取液荧光现象观察;铜代叶绿素反应;仔细观察和记录实验结果。

画图说明叶绿体色素纸层析结果,并解释原因。

解释叶绿素的荧光现象。

解释叶绿体色素分子的替代作用现象。;研磨提取叶绿素时,为何要加入CaCO3?

铜在叶绿素分子中具有替代镁的作用,这有何实用意义?

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