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细胞复苏与计数

北京师范大学薛秀花

东风解冻万物复苏

1

1实验背景

人宫颈癌细胞

HeLa细胞系

2018年

1951年细胞冻存细胞复苏

(引自Nature2010,643:610)

1实验背景

细胞复苏原则

缓慢融化

-196℃室温

快速融化

1实验背景

手工法

显微镜计数

细胞计

数方法

自动分析仪

计数

手工法显微镜计数

加样

细胞计数

原则

m

1m

23-43

大方格体积:0.1mm×1mm=0.1mm=1×10cm

细胞个数/1mL=4个大方格细胞总数/4×104×稀释倍数

1实验背景细胞生长状态

噻嗪类(甲苯胺蓝)

碱性染恶嗪类(亮焦油蓝)

丫嗪类(中性红、詹纳斯绿)

活体染三酚苯甲烷类(甲基紫)

酸性染台盼蓝、刚果红、吡咯蓝

细胞存活百分率

台盼蓝染色

1实验背景

培养液培养液细胞增殖

酸碱度浑浊缓慢

常见细胞污染的信号

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