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J亚群禽白血病病毒嵌合多表位基因酿酒酵母表面展示开题报告

题目：J亚群禽白血病病毒嵌合多表位基因酿酒酵母表面展示

摘要：禽白血病（AvianLeukosis，简称AL）是由J亚群禽白血病病毒（JsubgroupAvianLeukosisVirus，简称JALV）引起的一种严重传染病，严重威胁禽类养殖业的发展。针对这一问题，本研究设计了一种酿酒酵母表面展示技术，将JALV嵌合多表位基因表达在酿酒酵母表面，以期达到疫苗候选的可重复、经济、高效和安全性。

关键词：J亚群禽白血病病毒；嵌合多表位基因；酿酒酵母；表面展示；疫苗

I.研究背景和意义

禽白血病是禽类中常见的一种病毒性疾病，能够引起禽类肿瘤、内脏器官损伤和机体免疫力降低等问题，对禽类养殖业的发展造成巨大影响。其中，J亚群禽白血病病毒是目前最常见、最具侵袭性和致病性的病毒亚群之一。长期以来，各国科学家一直在致力于疫苗的研制，但由于JALV的高度变异和复杂性，使得疫苗的研制成果不尽如人意。

表面展示技术是一种新型的疫苗设计方法，通过将外源抗原的表位与宿主细胞表面蛋白功能域或蛋白质结构域进行融合，使得外源抗原表位表达在宿主细胞表面，从而触发宿主机体抗体的产生。而酿酒酵母作为一种经济安全的工业微生物，表面展示技术已经得到广泛应用。因此本研究将利用酿酒酵母表面展示技术，在酿酒酵母表面展示JALV嵌合多表位基因，设计一种新型的JALV疫苗候选。

II.研究内容和方法

1.JALV嵌合多表位基因的构建

利用PCR技术设计并合成包含JALV细胞膜蛋白gp37和gp85的嵌合多表位基因，并在基因序列中插入酵母表面蛋白CFP-Ty1E标签。

2.酿酒酵母表面展示技术构建

将嵌合多表位基因插入酿酒酵母表面蛋白Agα1p的表达载体pCT-AGA，并通过酵母转化方式将表达载体导入酿酒酵母细胞中进行表达。

3.JALV疫苗候选的制备和检测

采集酵母表面展示的JALV嵌合多表位基因，利用Westernblot和流式细胞术检测其表达情况和表面展示效果。同时，通过小鼠模型实验验证其免疫保护效果。

III.研究预期结果和意义

本研究预期通过嵌合多表位基因和酿酒酵母表面展示技术构建出一种高效的JALV疫苗候选，为JALV的防治和禽类养殖业的发展提供技术手段。同时，该设计方法也可对其他禽类病毒的疫苗研制和免疫研究提供借鉴意义。