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SSTR胞外区多克隆抗体的制备及其对猪垂体细胞GH分泌的影响及机制的开题报告
一、研究背景
生长激素（GH）是由垂体前叶分泌的蛋白质激素，对生长发育、代谢、免疫、生殖等方面具有重要作用。与肝脏中的生长激素受体（GHR）结合后，GH能够促进本体细胞增殖、分化以及蛋白质合成。GH的合成、分泌和以及与GHR的结合等多个环节都有其调控机制，其中GH释放激素（GHRH）和胆固醇代谢产物龙胆酸（LC）等都能够促进GH的分泌。生长激素抑制因子（SSTRs）是一类G蛋白偶联受体，与SSTR的激动剂联结后，能够抑制胞内环腺苷酸酶（AC）的活性，然后抑制细胞外信号的传导。然而在猪垂体细胞中，不同亚型的SSTRs对GH的分泌影响并不相同，具体影响机制亟需深入研究。
二、研究目的
本论文旨在使用多克隆抗体来研究SSTR胞外区在猪垂体细胞中的表达情况，并通过体外实验探究SSTR胞外区对GH分泌的影响及其机制。
三、研究方法
1.制备和鉴定SSTR胞外区多克隆抗体
通过基因工程技术制备SSTRs的胞外区融合蛋白，然后免疫小鼠，制备多克隆抗体。利用SDS和Westernblot技术鉴定抗体的灵敏度和特异性。
2.猪垂体细胞细胞系的构建和分离
将猪垂体组织细胞分离后，通过细胞培养的方法建立猪垂体细胞细胞系。通过细胞免疫荧光法鉴定细胞种类。
3.实验组设计
将猪垂体细胞细胞系分为对照组、SSTRs激动剂处理组和SSTRs拮抗剂处理组。通过检测GH分泌和GHRH、LC等相关基因和蛋白的表达，探究SSTRs对GH分泌的影响机制。
四、研究意义
本研究通过制备多克隆抗体，成功对SSTRs的胞外区进行了表达，为深入探究SSTRs对GH分泌的影响机制提供了重要工具。本研究对于了解SSTRs的作用机制以及研究GH的分泌与调节具有重要的理论和实践意义。
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