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第10单元生物技术与工程第6讲基因工程的基本工具

A组

一、单选题

1.如图是三种限制酶的脱氧核苷酸识别序列和切割位点示意图(↓表示切点)。下列相关分析错误的是(D)

A.这三种限制酶切割出的DNA片段末端都是黏性末端

B.不同限制酶切割DNA所得的黏性末端可能相同

C.能被限制酶3切割的DNA也能被限制酶1切割

D.同一个DNA分子经限制酶1和限制酶3分别切割后所得片段数一定相等

解析:据图可知,这三种限制酶切割位点均位于中轴线两侧,切割出的DNA片段末端都是黏性末端,A正确;DNA经限制酶1和限制酶3分别切割,所得的DNA片段黏性末端相同,B正确;能被限制酶3切割的DNA也能被限制酶1切割,但能被限制酶1切割的DNA不一定能被限制酶3切割,故同一个DNA分子经限制酶1和限制酶3分别切割后所得片段数不一定相等,C正确,D错误。

2.(2024·天津六校联考)如表列举了几种限制酶的识别序列及其切割位点(箭头表示相关酶的切割位点)。如图是酶切后产生的几种末端。下列说法正确的是(B)

A.BamHⅠ切割的是氢键,AluⅠ切割的是磷酸二酯键

B.Sau3AⅠ和BamHⅠ切割的序列产生的片段能够相连,连接后的片段还能被Sau3AⅠ切割

C.DNA连接酶能连接②⑤,不能连接②④

D.E.coliDNA连接酶和T4DNA连接酶都能连接①③,且连接效率低

解析:BamHⅠ与AluⅠ切割的均是磷酸二酯键,A错误;BamHⅠ切割,Sau3AⅠ切割,故二者切割后产生的黏性末端是相同的,因此二者切割后产生的黏性末端能够相连,连接后的片段能被Sau3AⅠ切割,但是不一定能被BamHⅠ切割,B正确;②⑤的黏性末端相同,②④的黏性末端也相同,因此DNA连接酶能连接②⑤,也能连接②④,C错误;E.coliDNA连接酶是从大肠杆菌中获得的DNA连接酶,只能连接黏性末端,T4DNA连接酶既可以连接黏性末端也可以连接平末端,而图中①③属于平末端,只能用T4DNA连接酶连接,D错误。

3.杨树被根瘤农杆菌感染后会增生并长出瘤状物,称为冠瘿,冠瘿内的冠瘿碱是一种含氮有机物,是根瘤农杆菌生存的唯一碳源和氮源。冠瘿的形成是由于根瘤农杆菌携带有天然的Ti质粒,其结构如图所示。下列说法错误的是(C)

A.Ti质粒上的生长素基因可在杨树生长发育过程中发挥作用

B.Ti质粒上的T-DNA区域,至少含有一个限制酶的酶切位点

C.冠瘿碱合成基因在根瘤农杆菌细胞中表达并分泌到细胞外

D.根瘤农杆菌内Ti质粒的存在,决定了其侵染植物的范围

解析:根瘤农杆菌感染植物体后,农杆菌的Ti质粒中含有的生长素基因、细胞分裂素基因经表达产生了生长素和细胞分裂素,生长素促进细胞伸长,细胞分裂素促进细胞分裂,因此植物产生瘤状结构,A正确;Ti质粒上的T-DNA区域,至少含有一个限制酶的酶切位点,以便于切割后与目的基因结合,构建基因表达载体,B正确;T-DNA上的冠瘿碱合成基因在农杆菌中不表达,在植物细胞中可以表达,故根瘤农杆菌不会形成冠瘿,而杨树被根瘤农杆菌感染后会形成冠瘿,C错误;结合题意“冠瘿的形成是由于根瘤农杆菌携带有天然的Ti质粒”,且Ti质粒上有T-DNA,可以将目的基因整合到宿主细胞内,故根瘤农杆菌内Ti质粒的存在,决定了其侵染植物的范围,D正确。

4.如图是利用基因工程技术构建重组表达载体的过程示意图,其中PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ为四种限制酶。下列相关叙述错误的是(C)

A.需要用限制酶PstⅠ和EcoRⅠ来切割质粒

B.表达载体中的青霉素抗性基因在受体细胞中能复制

C.任何基因表达载体中都必须要有青霉素抗性基因作为标记基因

D.表达载体中目的基因的上游有启动子,复制原点不一定位于目的基因上游

解析:限制酶SmaⅠ的识别序列位于目的基因上,因此表达载体构建时不能用限制酶SmaⅠ,应用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ,A正确;表达载体中的青霉素抗性基因在受体细胞中能稳定存在且遗传给下一代,B正确;基因表达载体中标记基因的种类很多,不一定都是青霉素抗性基因,C错误;表达载体中目的基因的上游有启动子,是RNA聚合酶识别和结合部位,能驱动目的基因转录出mRNA,D正确。

5.(2024·辽宁沈阳质检)下列关于DNA粗提取与鉴定的叙述,错误的是(B)

A.预冷的乙醇可使溶解于研磨液中的DNA析出

B.用相同方法从等体积猪血和鸡血中提取的DNA量相近

C.DNA析出后,可将溶液倒入离心管中进行离心,弃上清液,将管底的沉淀晾干

D.用二苯胺试剂鉴定DNA需要进行沸水浴加热

解析:猪是哺乳动物,哺乳动物的成熟红细胞中没有细胞核,不含DNA,而鸡的成熟红细胞中有细胞核,含DNA,因此用同样方法从等体积猪血和鸡血中提取的DNA量不是相近的,B错误。

6.(

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