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DNA测序技术和PCR技术的建立与发展的开题报告

一、背景介绍

DNA测序技术是指通过对DNA分子的测序来确定DNA分子的确切序列。PCR技术（聚合酶链式反应）是通过在体外复制DNA分子来增加DNA分子数目的一种技术。这两项技术的出现和发展使得分子生物学领域研究能够突破传统的细胞组织层面，更加深入和具体地研究DNA分子的组成和作用机制。本文将对这两项技术的建立与发展进行探讨。

二、DNA测序技术的建立与发展

1.外源性测序法：20世纪70年代，Sanger等人首次提出了外源性测序法，通过添加不同于自然DNA序列的碱基来在定位的DNA链上制造停滞。这种方法书写了Sanger原则的基础，以及更现代的序列分析器所使用的工具。

2.内源性测序法：20世纪80年代中期，Chain首次报道了内源性测序法，这种方法能够让可逆终止核酸链延伸（dideoxysequencing）普及化，为分子生物学和生物技术的爆发性增长立下了汗马功劳。

3.自动化测序：90年代，自动化测序技术的应用大大提高了测序的准确性和速度。自动化测序机械化、高通量并可以自主化，极大的减少了出错和复杂的数据比对。

4.新一代测序技术：2005年以后，新一代测序技术的出现，极大的推动了测序技术的发展。它们使用了许多基于扩增生物技术的前沿技术，使我们能够在人类基因组项目之外进行更深入、更快的DNA测序。

三、PCR技术的建立与发展

1.PCR技术的诞生：在1983年，考夫曼和穆利斯首次发表了PCR技术的文章。PCR技术是一种快速、灵敏、特异性强的DNA体外扩增技术，最初是为了解决基因测序中体内无法扩增DNA序列的问题。

2.PCR技术进一步发展：PCR技术进一步发展，包括了内减旋转、真核体系中的RNA转录、自由重组和实现线型DNA的变换，都大大增加了PCR技术的应用范围。

3.实时PCR：近年来，实时PCR技术的发展已经从半定量PCR的初始策略发展到了高通量、高度可靠的工具，它可以监测PCR反应的动力学过程。

4.数字PCR：数字PCR技术是一种超灵敏的PCR技术，它可以分离成百上千个影响PCR放大和检测单元，它是非常适合检测细菌或病毒等微生物数量痕量物的技术。

四、结论

综上所述，DNA测序技术和PCR技术的建立与发展为分子生物学和生物技术的快速发展提供了技术支撑与深入研究的零部件。这两项技术在基因组学、医学、农业等方面应用广泛，大大提高了基础研究和应用研究的水平和准确性。在未来的研究中，这两项技术将为拥有更好的数据、更深的认识、更精准的结论和研究的成果打下坚实的基础。