植物生理学-8实验八-植物根系活力的测定.ppt

植物根系活力的测定主讲：吕巍博士一、目的意义根系具有的生理功能：植物根系是活跃的吸收器官和合成器官。吸收水分，吸收矿物质合成激素根的生长情况和活力水平直接影响地上部分的生长和营养状况及产量水平。通过本实验学习根系活力的测定方法，为植物营养研究提供依据。二、实验原理具有生活力的组织在呼吸作用过程中都有氧化还原反应，而无生活力组织则无此反应。TTC（2,3,5-氯化三苯基四氮唑）是一种水溶性物质，可以透过细胞膜进入细胞内部，并不伤害组织。当TTC溶液渗入活细胞内，作为氢受体被脱氢辅酶（NADH或NADPH）还原，产生红色的三苯基甲臜（TTF）。通过测定单位时间内TTC还原量，表示为脱氢酶活性，并作为根系活力的指标。活力强的部位呼吸速率高，还原的TTC多；呼吸作用弱，还原的TTC少，脱氢酶的活性亦大大下降，故可由红色的程度推知根系活力的强弱。应用：根系活力测定种子活力测定花粉活力测定TTCTTF三、实验材料小麦幼苗根系四、方法步骤1.标准曲线的制作TTC溶液，加少许Na2S2O4（保险粉），产生红色的TTF。吸收峰485nm，建立直线方程。2、根系活力称重0.5g放到小培养皿中（3份）空白用样品（1份）测定用样品（2份）加2ml1mol/L硫酸加入10mlTTC溶液加入10mlTTC溶液34-37℃，保温30min37℃，保温30min加2ml1mol/L硫酸取具有活力的根系，吸去表面水分，剪成2cm小段TTC溶液低温避光保存加入的TTC溶液不定量对结果是否有影响？为什么？空白用样品测定用样品吸去表面上的水分放入研钵中加石英砂，少量乙酸乙酯，研磨加5ml乙酸乙酯提取液过滤到20ml刻度试管中残渣冲洗2次，定容10ml485nm比色测定计算TTC还原强度五、注意事项1吸水滤纸可重复利用，用完放回。2吸干根系水分时，用力要轻，以免压坏根尖。3比色测定在(B-126)六、思考题为什么放置到34-37℃的黑暗处？加入硫酸的作用是什么？下一个实验：植物组织逆境伤害程度的测定（实验37）地点：B-131时间:第10周