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胸腔积液miRNA检测用于结核性胸膜炎诊断的研究进展

胸腔积液miRNA检测用于结核性胸膜炎诊断的研究进展

结核性胸膜炎诊断主要依靠细菌学、病理学、分子生物学、细胞免疫学及综合性诊断策略来实现，且与恶性胸膜疾病及其他感染性胸膜疾病鉴

结核性胸膜炎诊断主要依靠细菌学、病理学、分子生物学、细胞免疫

学及综合性诊断策略来实现，且与恶性胸膜疾病及其他感染性胸膜疾病鉴

性胸膜炎疾病进程和免疫状态的分子标志物已经成为研究的热点。微小RNA由于在各种临床样本中稳定性极高，能够快速准确地定量，使其有望成为一种非侵袭性的生物标志物来追踪疾病的发生、发展及预后，目前在别诊断困难。胸腔积液中存在着丰富的蛋白质、非编码RNA及代谢产物，能够反映宿主疾病病理进程和免疫状态，在胸腔积液中寻找能够指示结核

性胸膜炎疾病进程和免疫状态的分子标志物已经成为研究的热点。微小

RNA由于在各种临床样本中稳定性极高，能够快速准确地定量，使其有望

成为一种非侵袭性的生物标志物来追踪疾病的发生、发展及预后，目前在

良恶性胸腔积液鉴别诊断方面有一定的价值。本文将综述胸腔积液miRNA检测用于结核性胸膜炎诊断的现状及问题，为开发结核性胸膜炎诊断新技

术提供理论基础。

术提供理论基础。

多种疾病可以引起胸腔积液的异常积聚，包括结核性胸膜炎、恶性胸

多种疾病可以引起胸腔积液的异常积聚，包括结核性胸膜炎、恶性胸

膜疾病及肺炎等。在结核病高负担国家，由结核性胸膜炎和恶性胸膜疾病引发的胸腔积液最为常见[1,2,3]。目前，结核性胸膜炎的诊断主要依靠病史、临床表现、影像学、胸腔积液常规检查和疗效观察，确诊率较低，特别是

与恶性胸腔积液鉴别诊断困难

与恶性胸腔积液鉴别诊断困难 [4]，因此需要开发敏感度和特异度较高、 操作

性强的诊断方法，用以实现结核性胸膜炎的快速诊断。

性强的诊断方法，用以实现结核性胸膜炎的快速诊断。

miRNA不仅存在于细胞中，还存在于各种体液中，参与包括传染性疾 病在内的多种疾病的病理生理过程 [5,6]。miRNA稳定性好、抗酸碱、抗酶

降解、抗反复冻融和其他极端条件，是一种对疾病诊断、治疗和预后监测

意义[8,9,10]。有重要意义的生物标志物 [7]。已有多项研究探讨并肯定了胸腔积液 miRNA检测用于各类肺癌诊断的价值，提示胸腔积液 miRNA检测的可行性和重要

意义[8,9,10]。

一、胸腔积液 miRNA

一、胸腔积液 miRNA定量检测方法

miRNA定量检测主要依靠芯片、二代测序、 qPCR及数字PCR。前两者是高通量检测方法，适合于 miRNA 标志物的初步筛选[11]。数字 PCR

技术刚刚起步，在 miRNA

技术刚刚起步，在 miRNA定量检测方面的研究较少，因其敏感度较高，主

要应用于外泌体 miRNA

要应用于外泌体 miRNA的检测[12,13]。

目前大多数研究均依靠 qPCR技术完成对胸腔积液中 miRNA的定量检测。

与细胞内miRNA检测类似，也分为探针法和引物法，两种方式各有千秋。但目前商业化的探针或引物并不能满足所有miRNA检测的需要，研究者尚需要根据靶标不同进行设计。目前胸腔积液或其他体液中miRNA的定量检

测并没有确定的内参基因，但有

测并没有确定的内参基因，但有

3种选择：（1）沿用已经在细胞中证实可

用的内参基因，如

用的内参基因，如 U6；（2）在前期高通量芯片或测序结果中筛选样本间

稳定表达的miRNA作为内参；（3）RNA提取时定量引入外参miRNA，如Cel-miR-39。这3种方法在既往研究中均有应用，但目前尚不能确定哪一种方法更准确和可靠[14,15]。在胸腔积液miRNA检测中，如果有条件，

应使用至少 2

应使用至少 2种以上内参进行检测，综合评价定量效果。

二、胸腔积液 miRNA检测用于结核性胸膜炎诊断的研究现状

胸腔积液 miRNA诊断结核性胸膜炎：目前针对结核性胸腔积液与

腔积液与其他类胸腔积液合并为良性胸腔积液，与恶性胸腔积液进行鉴别其他类型胸腔积液，应用 miRNA定量检测进行鉴别诊断的研究相对较少， 大部分数据来源于恶性胸腔积液特异性 miRNA的研究，其中多将结核性胸

腔积液与其他类胸腔积液合并为良性胸腔积液，与恶性胸腔积液进行鉴别

诊断。Han等[16]发现miR-198在肺癌胸腔积液中的表达量显著低于结核

性胸腔积液和肺炎旁胸腔积液，与癌胚抗原（carcinoembryonicantigen,CEA）和细胞