高效液相色谱法及其应用.pdf

技术

高效液相色谱法及其应用

口熊素玉杨丽昌吉州食品药品检验所

摘要：目前，高效液相色谱法已发展出多种不同的固定相，扩大了适用范围，提升了应用价值。如今，高效液相色

谱法已在生物工程、制药工业、食品工业、环境监测和石油化工等领域获得广泛应用。因此，本文主要探究高效液相色谱

法及其应用，以供参考。

关键词：高效液相色谱法；吸附色谱法；离子交换色谱法

高效液相色谱法是有别于经典液机理分类，可以分为以下两种不同类型。2．5亲和色谱法

相色谱，是在20世纪6O年代末期，2_]吸附色谱法亲和色谱法是一种模拟生物分子之

在经典液相色谱法和气相色谱法的基础吸附色谱法是将吸附剂作为固定间专一联系的色谱法，从生物样品中分

上，发展起来的新型分离分析技术。2O相的色谱办法，其中使用最多的吸附离出特殊物质。当样品进入色谱柱，待

世纪6O年代未，随着色谱理论的发展，剂就是硅胶。流动相所使用的溶剂是检测物质被配基吸引、停留，其他物质

色谱工作者已认识到采用微粒固定相是混合试剂。在吸附色谱法中，根据不没有亲和作用直接流出。这种办法经常

提高柱效的重要途径。随着微粒固定相同的组成成分和固定相形成不同的分用于研究生物分子之间存在的化学生物

的研制成功，液相色谱仪制造商在借鉴离流，如果成分越多，就会有更强的反应以及其特性，非常具有应用价值。

气相色谱仪研制经验的基础上，成功制吸附力，保留的时间也会更多。2．6手性色谱法

造了高压输液泵和高灵敏度检测器，从2．2液一液分配色谱法手性色谱法中的色谱是镜像存在，

而使液相色谱法获得了新生。这种办法就是将不同且互不相容运用在不能被直接拆分的制各方案中。

1．高效液相色谱仪特点的两者溶剂放在一起，分离时溶入两引入手性，形成络合物，分子之间存

1I1高压个相。通过化学键，实现固定相，这在的作用力可以吸引，也可以消失，

液相色谱法以液体为流动相(称里可以运用分配色谱的原理进行理解。就能得到控制。手性固定相有多种，

为载液)，液体流经色谱柱，受到的键合相色谱法是非常重要的一种办法，比如蛋白质类手性因定相等，他们都

阻力较大。为了迅速通过色柱，应用也最为广泛。有很大的应用价值。

必须对载液施加高压。一般可达按照固定相和流动相极性，可以3．应用

l50～350×1O5Pa。分为正相色谱法和反相色谱法。3．1鉴别

1．2高速正相色谱法是存在于固定相极性在高效液相色谱法中，主要是鉴

流动相在柱内的流速较经典色谱大于流动性极性的分配色谱法中的一别定性参数。所以，经常用这种办法

快得多，一般可达1～10mL／min。种呈现。通过多种极性化学键进行固鉴别许多药物，如头孢类药物等。

高效液相色谱法所需的分析时间较之定是常用的固定相，正相色谱的流动3．2杂质检查

经典液相色谱法少得多，一般少于1h。相一般极性较小。反相色谱法与正相由于高效液相色谱法的分离作用

1．3高效色谱法正好相反，其固定性是非极性，很好，所以药物杂质检查就有了很大

近年来，研究出许多新型固定相，最常用的固定相是十八烷基硅烷键合的应用空间。检查的药物主要是指那

大大提高了分离效率。硅胶等。目前，反相色谱法比正相色些合成原料、中间体、副产物等，这

14高灵敏度谱法更常见，运用更加广泛。些杂质与药物成分相似，含量低，很

高效液相色谱已广泛采用高灵敏23离子交换色谱法难去除，可以用色谱方法将其分离。

度的检测器，进一步提高