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基因工程的基本工具和基本操作程序练习
一、选择题
1.如图表示由不同的限制酶切割而成的DNA末端及相关的酶作用位点。下列叙述错误的是()
A.甲、乙、丙都属于黏性末端
B.甲、乙片段可形成重组DNA分子,但甲、丙不能
C.DNA连接酶的作用位点在图乙中b处
D.切割甲的限制酶不能识别由甲、乙片段形成的重组DNA分子
2.图甲、乙中的箭头表示三种限制性内切核酸酶的酶切位点,AmpR表示氨苄青霉素抗性基因,neoR表示新霉素抗性基因。下列叙述错误的是()
A.在构建重组质粒时,可用PstⅠ和HindⅢ切割质粒和外源DNA
B.在酶切过程中,不能破坏质粒中全部的标记基因
C.若只用PstⅠ处理质粒和外源DNA分子片段,无法避免自身环化和反向连接
D.导入重组质粒的大肠杆菌可以在含氨苄青霉素的培养基中生长
3.将外源基因送入细胞通常是利用质粒作为载体。下列有关质粒的叙述,正确的是()
A.质粒上常有特殊的标记基因,以便于重组DNA分子的筛选
B.质粒从细胞中提取出来后即可以直接使用,无须人工改造
C.质粒是具有自我复制能力的DNA分子,只存在于原核生物中
D.质粒一般只有一个限制酶切割位点,以便于目的基因插入
4.农杆菌Ti质粒上的T-DNA可以转移并随机插入被侵染植物的染色体DNA中。研究者将图中被侵染植物的DNA片段连接成环,并以此环为模板进行PCR,扩增出T-DNA插入位置两侧的未知序列,以此可确定T-DNA插入的具体位置。下列说法错误的是()
A.PCR扩增依据的是DNA分子双链复制的原理
B.进行PCR扩增需要耐高温的DNA聚合酶
C.利用图中的引物②③组合可扩增出两侧的未知序列
D.通过与受体细胞的基因组序列比对,可确定T-DNA的插入位置
5.通过引物设计,运用PCR技术可以实现目的基因的定点诱变,如图为基因工程中获取突变基因的过程,其中引物1序列中含有一个碱基T不能与目的基因片段配对,但不影响引物与模板链的整体配对,反应体系中引物1和引物2分别设计增加限制酶a和限制酶b的识别位点。下列有关叙述正确的是()
A.限制酶a和限制酶b的识别位点分别加在引物1和引物2的3′端
B.PCR反应体系中需要加入脱氧核苷酸、模板、Ca2+等
C.第2轮PCR中,引物1与图中②结合并形成两条链等长的突变基因
D.在第3轮PCR结束后,同时含引物1和引物2的DNA占3/4
6.OsGLO1、EcCAT、EcGCL和TSR四个基因分别编码四种不同的酶,研究人员将这些基因分别与叶绿体转运肽(引导合成的蛋白质进入叶绿体)基因连接,构建多基因表达载体(载体中部分序列如图所示),利用农杆菌转化法转化水稻,在水稻叶绿体内构建了一条新代谢途径,提高了水稻的产量。下列叙述正确的是()
A.可用抗原—抗体杂交技术检测四种酶在转基因水稻中是否表达
B.四个基因转录时都以DNA的同一条单链为模板
C.应选用含卡那霉素的培养基筛选被农杆菌转化的水稻细胞
D.四个基因都在水稻叶绿体内进行转录翻译
7.(多选)戊型肝炎病毒是一种RNA病毒,ORF2基因编码的结构蛋白(pORF2)位于病毒表面,构成病毒的衣壳。我国科研人员利用基因工程技术,在大肠杆菌中表达pORF2,制备戊型肝炎疫苗,过程如图。下列关于该疫苗的叙述正确的是()
A.过程①需要的酶是RNA聚合酶,原料是A、U、G、C
B.重组基因表达载体上的启动子需来源于大肠杆菌
C.过程⑤需要用聚乙二醇处理大肠杆菌使其处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态
D.过程⑥大量制备pORF2蛋白前应做相应的检测与鉴定
8.关于“DNA的粗提取与鉴定”实验,下列说法错误的是()
A.过滤液沉淀过程在4℃冰箱中进行是为了防止DNA降解
B.离心研磨液是为了加速DNA的沉淀
C.在一定温度下,DNA遇二苯胺试剂呈现蓝色
D.粗提取的DNA中可能含有蛋白质
9.如图是“DNA的粗提取与鉴定”实验中的两个操作步骤示意图。下列相关叙述不正确的是()
A.选用植物细胞提取DNA时需先研磨破碎细胞
B.图2所示实验操作中有一处明显错误,可能导致试管2中蓝色变化不明显
C.图1所示操作的原理是DNA不能溶于酒精,而蛋白质等杂质能溶于酒精
D.图2试管1的作用是证明物质的量浓度为2mol/L的NaCl溶液遇二苯胺试剂出现蓝色
10.某实验利用PCR技术获取目的基因,实验结果显示除目的基因条带(引物与模板完全配对)外,还有2条非特异条带(引物和模板不完全配对)。为了减少反应非特异条带的产生,以下措施中有效的是()
A.增加模板DNA的量 B.延长热变性的时间
C.延长延伸的时间 D.提高复性的温度
11.关于“DNA片段的扩增及电泳鉴定”实验,下列相关
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