植物的克隆［浙科］.ppt

植物A细胞植物B细胞去壁原生质体A原生质体B原生质体融合融合体再生壁杂种细胞细胞分裂愈伤组织杂种植株去壁方法：酶解法（纤维素酶、果胶酶等）原生质体融合方法：物理法：离心、振动、电刺激等化学法：聚乙二醇（PEG）植物体细胞杂交过程示意图植物组织培养的应用番茄与马铃薯同属茄科植物，但不是同属的植物。番茄的果实和马铃薯的块茎是我们经常食用的蔬菜。马铃薯的块茎生长在土壤中。

人们曾经有这样一个幻想：让一株植株地上部分结番茄，地下部分长土豆。这个幻想可能实现吗？2.2植物的克隆理论基础植物克隆技术基础植物组织培养植物克隆的现状（成就）植物细胞的全能性1、定义：植物体的每个生活细胞都具有遗传上的全能性，因而都具有发育成完整植株的潜能。2、原因：生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质，都有发育成为完整个体所必需的全部基因，。3、体现：（1）受精卵的全能性最高（2）植物细胞的全能性＞动物细胞的全能性（3）不同植物或同一植物的不同基因型的个体，细胞的全能性表达程度大不相同一、植物细胞的全能性受精卵生殖细胞体细胞＞＞思考讨论：为什么体内细胞没有表现出全能性，而是分化成为不同的组织、器官？基因在特定空间和时间条件下选择性表达的结果。在个体发育的不同时期，生物体不同部位的细胞表达的基因是不同的，合成的蛋白质也不一样，从而形成了不同的组织和器官。4、植物细胞全能性表达的条件离体状态有一定的营养物质、激素、和其他外界条件。1、培养基定义：含有一定营养成分，供组织培养植物生长的基质无机营养成分：水、矿质元素有机营养成分①含N物质：包括维生素和氨基酸②碳源：2%—5%的蔗糖③琼脂：起支持作用（半固体固体）。激素：生长素，细胞分裂素和赤霉素等PH值：5.0－6.0二、植物组织培养2、植物组织培养的程序切取接种愈伤组织的形成愈伤组织：在人工培养基上由外植体长出来的一团无序生长的薄壁细胞（细胞排列疏松、无规则）。【胚状体】植物组织培养（试管苗的形成）培养室试管苗大规模培养移栽经过炼苗的小苗，可以和一般植物一样进行大规模栽培离体的植物器官、组织或细胞愈伤组织胚状体植物体外植体脱分化植物激素：细胞分裂素、生长素再分化植物组织培养过程：植物组织培养条件：含有全部营养成分的培养基、一定的温度、空气、无菌环境、适合的PH、适时光照等。3、几个概念：愈伤组织：离体的植物器官、组织或细胞，在培养一段时间以后，通过细胞脱分化、分裂，形成一种高度液泡化、无定形状态薄壁细胞组成的排列疏松无规则的组织。植物细胞的脱分化：由高度分化的植物器官、组织或细胞产生愈伤组织的过程，又称去分化。植物细胞的再分化：脱分化产生的愈伤组织在培养过程中重新分化根或芽等器官的过程。4.长期培养中面临的问题——培养物胚胎发生和器官形成能力下降！要获得植物克隆成功，需要做到：（1）（2）原因：（1）（2）（3）器官培养指以植物的根、茎、叶、花、果等器官为外植体的离体无菌培养。指以单个游离细胞为外植体的离体无菌培养。细胞培养三、植物克隆的成就原生质体培养获得原生质体的方法：纤维素酶和果胶酶溶液处理指以原生质体为外植体的离体无菌培养。植物细胞（包括原生质体转基因细胞（重组细胞新植株导入基因工程显微注射细胞融合外源遗传物质培养培养植物细胞工程多途径上的植物克隆实践阅读课文P24因为不同种生物之间存在着生殖隔离，所以用传统的有性杂交方法是不可能做到这一点的。植物体细胞杂交技术这幅番茄—马铃薯图利用传统有性杂交方法能实现吗？为什么？于是，这些科学家试图用这两种植物的体细胞进行杂交，来实现这一美妙的设想。1．你认为两个来自不同植物的体细胞完成融合，遇到的第一个障碍是什么？2．有没有一种温和的去壁方法呢？3．两个原生质体能发生融合与细胞膜的什么特性有关？4．如何将杂种细胞培育成杂种植株？请思考：⑴定义：用两个来自不同植物的体细胞融合成一个杂种细胞，且把杂种细胞培育成新的植物体的方法。⑵优势：打破了不同种生物间的生殖隔