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化妆品微生物防腐挑战试验方法

1范围

本文件规定了化妆品的防腐挑战试验方法，包括术语和定义、仪器及设备、培养基和试剂、生物菌

株、实验步骤和结果计数及报告方法。

本文件适用于亲水性的膏、霜、乳、水剂等常见化妆品的防腐效果测试。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，

仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本

文件。

GB/T6682-2008分析实验室用水规格和试验方法

《化妆品安全技术规范》

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

防腐preservation

采用物理或化学方法杀灭微生物或抑制微生物生长繁殖及其活性，防止化妆品腐败变质。

防腐挑战试验anticorrosionchallengetest

模拟化妆品可能出现的微生物污染情况，在化妆品中加入一定量的微生物，每隔一段时间检测其中

的活菌量，根据微生物的数量变化来判定产品抗微生物污染的能力和防腐功效。

4仪器及设备

测试所需仪器及设备如下：

a)生物安全柜；

b)高压蒸汽灭菌锅：温度121℃±2℃；115℃±2℃，压力103Kpa±5Kpa；

c)冰箱：2℃～8℃；

d)培养箱：36℃±1℃、28℃±2℃、22.5℃±2.5℃；

e)恒温水浴锅：45℃～50℃；

f)振荡器；

g)天平：精确至0.01g；

h)pH计；

i)移液器：容量1mL、5mL和10mL；

j)无菌试管：15mm×150mm；

k)无菌培养皿：直径90mm；

l)锥形瓶：容量250mL；

m)玻璃珠；

n)玻璃棒；

o)均质器；

p)离心机。

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5培养基和试剂

通则

所用的试剂和材料应是适用于生物学试验的。实验室可以按照实际情况选用，允许使用验证合格的

其它配方，推荐使用商品化试剂及耗材，并按照生产商提供的说明书使用。

所用的水应为符合GB/T6682规定的三级水。

营养琼脂培养基

5.2.1成分

营养琼脂培养基所需成分如下：

——蛋白胨10.0g；

——牛肉膏粉3.0g；

——氯化钠5.0g；

——琼脂15.0g；

——蒸馏水1000mL。

5.2.2制法

取上述成分混合，溶解，用1mol/L氢氧化钠溶液或1mol/L盐酸溶液调节pH值至7.3±0.2,分装，

于121℃高压灭菌15min。

卵磷脂-吐温80营养琼脂培养基

5.3.1成分

卵磷脂-吐温80营养琼脂培养基所需成分如下：

——蛋白胨20.0g；

——牛肉膏3.0g；

——氯化钠5.0g；

——琼脂15.0g；

——卵磷脂1.0g；

——吐温807.0g；

——蒸馏水1000mL。

5.3.2制法

先将卵磷脂加到少量蒸馏水中，加热溶解，加入吐温80,将其他成分加到其余的蒸馏水中，溶解。加

入已溶解的卵磷脂、吐温80,混匀，用1mol/L氢氧化钠溶液或1mol/L盐酸溶液调节pH值至7.1～7.4,分

装，于121℃高压灭菌20min。

沙氏琼脂培养基

5.4.1成分

沙氏琼脂培养基所需成分如下：

——蛋白胨10.0g；

——葡萄糖40.0g；

——琼脂15.0g；

——氯霉素0.1g；

——蒸馏水1000mL。

5.4.2制法

取上述成分混合，溶解，分装，于115℃高压灭菌15min。

卵磷脂-吐温80沙氏琼脂培养基

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5.5.1成分

卵磷脂-吐温80沙氏琼脂培