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[课标
要求];目的基因;拓展;苏云金杆菌;;1.限制酶;(1)源于选择性必修3P71“旁栏思考”:①原核生物中存在限制酶的意义是什么?;突破:用限制酶切割时需注意的事项
①获取目的基因和切割载体时,通常使用同种限制酶,目的是。但是使用该法缺点是容易发生,为了避免上述情况发生,可采取的措施是。
②获取一个目的基因需限制酶切割次,共产生个游离的磷酸基团。;(3)确保出现相同黏性末端原则:通常选择与切割目的基因相同的限制酶,如图甲中PstⅠ;为避免目的基因和质粒自身环化和随意连接,也可使用不同的限制酶切割目的基因和质粒,如图甲也可选择PstⅠ和EcoRⅠ两种限制酶。;例1.①用图1中的质粒和图2中的外源DNA构建重组质粒,不能使用SmaⅠ切割,原因是。
②构建重组质粒时,最好选择限制酶BamHⅠ、HindⅢ处理质粒、外源DNA,这样做的目的是。;例2.如图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线;2.DNA连接酶;(1)限制酶与DNA连接酶的关系(如下图):;环状双链DNA分子;1.在基因工程中,已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—,限制酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—。根据下图示判断下列操作错误的是();2.某线性DNA分子含有3000个碱基对(bp),先用限制酶a切割,再把得到的产物用限制酶b切割,得到的DNA片段大小如表所示。限制酶a和b的识别序列和切割位点如图所示。下列有关说法正确的是();例1.下表为常用的限制性内切核酸酶(限制酶)及其识别序列和切割位点,由此推断以下说法中,错误的是();目的基因的筛选与获取;①从相关的已知结构和功能清晰的基因中进行筛选是较为有效的方法之一。
②利用序列数据库和序列比对工具进行筛选。;;;;易错提醒;6.利用重叠延伸PCR技术进行定点突变可以实现对纤维素酶基因进行合理性改造,其过程如下图所示。下列分析不正确的是
A.PCR1过程中的产物AB是依赖引物a和引
物b扩增的结果
B.引物c和引物b上均含有与模板链不能互
补的碱基
C.①过程需要先加热至90℃以上后再冷却
至50℃左右
D.②过程需要利用引物a和引物d获得突变
产物AD;2.(2020·北京,12)为了对重金属污染的土壤进行生物修复,研究者将从杨树中克隆的重金属转运蛋白(HMA3)基因与外源高效启动子连接,导入杨树基因组中(如图)。为检测获得的转基因杨树苗中是否含有导入的HMA3基因,同时避免内源HMA3
基因的干扰,在进行PCR扩增时,
应选择的引物组合是
A.①+③ B.①+②
C.③+② D.③+④;(1)基因表达载体的目的;(3)基因表达载体的构建过程;将目的基因导入受体细胞的方法;(1)花粉管通道法;(2)农杆菌转化法示意图;显微注射法;使用Ca2+处理:;类型;玉米是二倍体植物,某科研人员将BT毒蛋白基因导入玉米细胞,培育转基因抗虫玉米,实验流程图如下,EcoRⅠ、SmaⅠ、BamHⅠ为限制酶(箭头所指为酶切位点)。回答下列问题
(1)过程①构建重组质粒时,为使BT毒蛋白基因与质粒定向拼接,应选用_____________(填
限制酶名称)切割BT毒蛋白基因与质粒,不选另一种限制酶因为_____________________
图中质粒没有标明的结构是___________,该结构的作用是_____________________。
(2)过程②常用农杆菌转化法将重组质粒导入愈伤组织,该方法能够借助Ti质粒上的_______
将BT毒蛋白基因整合到愈伤组织的________________________。;紫花苜蓿是一种重要的牧草。某研究团队拟将耐盐基因HAL1导入紫花苜蓿中培育耐盐牧草。具体实验流程如图所示。下列操作错误的是 (
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