饲料中脂肪酸含量的测定.ppt

*常规脂肪提取方法1.Soxhlet(索氏)萃取法的优缺点-优缺点不需要加水分解节省时间仪器价格低廉广范围的应用蛋白质、碳水化合物含量高时不适用随溶剂的种类、提取时间的变化结果不同其他亲水性物质也一块提取磷脂只能部分提取需要大量的溶剂，制动化不易-应用分支一般食品行业为其他分析而除去脂肪第31页,共62页，星期六，2024年，5月*2.酸水解(acidhydrolysis)酸水解的必要性直接用Soxhlet(索氏)提取法不能把所有的脂肪提取出来碳水化合物、蛋白质等把脂肪包裹的情况植物细胞或starch-membrane(淀粉膜)中掺杂的情况非溶性胶质把脂肪包裹的情况(牛奶、乳酪、奶油)乳制品、谷类、面包、蛋类、鱼类、肉类、豆腐原理试样经酸水解后用乙醚提取，除去溶剂即得总脂肪含量。酸水解法测得的为游离及结合脂肪的总量-酸分解过程加入4MHCl时样品的matrix成分分解过滤后脂肪分离用热水洗涤干燥之后提取,干燥后测量重量变化计算脂肪含量常规脂肪提取方法第32页,共62页，星期六，2024年，5月*3.其他fat分析方法Phospho-,di-,monoglyceride(磷脂、甘油二酯、甘油单酯)比起一般只有三个脂肪酸的甘油三酯具有低的热量各脂肪含有磷脂(Phosphatide)的混合物时磷脂可以分离为脂肪但是在提取过程中会有部分的损失因此完美的提取很困难原理试样经酸水解后用乙醚提取，除去溶剂即得总脂肪含量。酸水解法测得的为游离及结合脂肪的总量

?用高沸点的溶剂提取→KOH???→加入酸溶液→转换为脂肪酸→决定脂肪含量常规脂肪提取方法第33页,共62页，星期六，2024年，5月*原理为了脂肪样品的气象色谱分析，首先要分离为单一的脂肪酸状态脂肪(或者脂类、不溶于水但是溶于有机溶剂的特性的物质)大概分为单纯脂肪(Triglycerides,diglycerides,monoglycerides,freefattyacidscholesterolesters,cholesterolandwaxesesters)和极性或者复合脂肪(磷脂及糖脂)脂肪可以通过多种有机溶剂从组织中提取但是对于组织的酶类和非活性化的脂肪要完全提取出需要注意脂肪酸提取方法第34页,共62页，星期六，2024年，5月*具有细胞壁的复合脂肪具有hydrogenbond或hydrophobicforces及ionicbond的蛋白质及碳水化合物的细胞内的其他化合物连接，因此不容易提取从组织中提取脂肪需要用像chloroform(氯仿)一样可以溶解脂肪还可以与methanol一起把脂肪和组织之间的matrix之间的相互作用给分解的溶剂糖(sugars)、氨基酸及盐(salts)等non-lipidcontaminants需要通过washingprocedure从提取物中剔除掉，这样的方法可以参考Folch,Lees及Stanley(1957)的建议脂肪酸提取方法第35页,共62页，星期六，2024年，5月*用chloroform-methanol(2:1,v/v)把提取物进行摇荡后加入占?体积的salinesolution(0.88%inwater)进行平衡这时混合物分成2个层,下层为氯仿层包含所有脂肪，上层为methanol-waterphase包含non-lipidcontaminants方法:2.脂肪提取样品:flaxseed(亚麻籽),margarine(人造黄油),groundbeef,Blank(不含所测物质)试剂:1)Folchsolution:chloroform:methanol(2:1,V/V)2)0.88%NaCl提取步骤:1)准确称取1.0ggroundbeef,0.2g的flaxseed或0.1g的margarine放入50mlTeflonlinedscrewcaptube后加入20ml的Folchsolution。脂肪酸提取方法第36页,共62页，星期六，2024年，5月*2)Homogenizing3)拧紧盖子并在在室温1~2h摇晃(必要时加入N2)加入4ml的0.88%NaCl，并充分混合1500rpm，4℃，10mincentrifuge.分2层.记下Chlorform层的体积，并把上