食品安全快速检测—转基因食品的快速检测.pptx

多聚酶链式反应技术

什么是食品安全检测箱

多聚酶链式反应技术

多聚酶链式反应技术

基本实验步骤

多聚酶链式反应技术

多聚酶链式反应技术

多聚酶链式反应技术

多聚酶链式反应技术

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衍生PCR技术

多聚酶链式反应技术

逆转录PCR

多聚酶链式反应技术

RealTimeqPCR

多聚酶链式反应技术

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荧光嵌合法(TBGreen™)

荧光探针法

多聚酶链式反应技术

多聚酶链式反应技术

多聚酶链式反应技术

固定循环数后，荧光信号与模板数成正比。

初始DNA量越多,荧光达到阈值时所需要的循环数(Ct值)越少。

起始模板的对数浓度与Ct呈线性关系，根据样品的Ct值就可计算出样品中所含的模板量。

多聚酶链式反应技术

多聚酶链式反应技术

处理时间

EGFR平均CT

（目的）

GAPDH平均CT

（内参）

Normalized

EGFR表达ΔCt

Calibrated

EGFR表达ΔΔCt

变化倍数

2−ΔΔCt

0h

24.5

12.6

11.9

0

1

6h

23.2

12.5

10.7

-1.2

2.3

24h

25.4

11.6

13.8

1.9

0.27（降低4倍）