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中药鉴别中常用的方法
1.中药鉴别中常用的方法是什么?为什么?
十九世纪至二十世纪,中药鉴别最常用的“四大鉴定”。
4.理化鉴定,是利用中药所含化学成分的某些物理性质或化学反应对
中药进行定性和定量分析,一般应用于含不同化学成分、性状相似而又无
明显显微鉴定特征的药材。
常用的现代中药鉴别方法:
由于物理、化学、生物学和计算机的加速发展使仪器分析的手段不断
更新,紫外、红外、气相、高效液相、核磁共振、扫描电子显微镜、计算
机图象处理分析、各种电泳、同功酶分析法、分子生物学技术、某射线衍
射技术、差热分析技术、聚类分析法等均被吸收到中药鉴别的方法中来,
大大的丰富了中药鉴别方法,形成了以“四大鉴别”法为基础,以理化分析
为重点,逐步适应中药现代化并利于中药走向世界的一套更为科学、完善、
先进的中药鉴别体系。
1.色谱法。色谱法是20世纪初产生,于60年代开始用于中药分析,
经逐步完善最后列入1977年中国药典,并在以后各版药典的中药和成方制
剂中的应用比例迅速上升,成为中药鉴别的最主要的方法之一。其理论基
础是上述的层析法,根据色谱法的分离方法可为纸色谱法、薄层色谱法、
柱色谱法、高效液相色谱法、气相色谱法。
(1)薄层色谱法(TLC)。薄层色谱法用于生药主要成分的定量测定,
具有用量少,方法简便,适用范围广,重现性好等特点,除可将薄层上主要成
分斑点刮取,经溶剂洗脱后进行测定外,也可在薄层柱上直接测定含量。当
前应用较多的是薄层扫描法(TLCS),由于不必洗脱等操作,因而方便快速,
测量灵敏度高。
(2)高效液相色谱法(HPLC)。HPLC法由于具有分离效能高,分析速
度快等优点,近期已广为普及用于中药的定量分析,在中药的定性鉴别中亦
能发挥很好的作用。(3)气相色谱法(GC)。气相色谱法的流动相为气体,
称为载气,通常多用氮气,具有高效、高选择性、高灵敏度、用量少、分析
速度快等优点。对于一些具有挥发性成分的中药鉴别能发挥独特的优点。
如将气相色谱与质谱联用(GC/MC),将经气相分离的成分直接输入质谱仪进
行定性鉴别,这样不但可知道不同中药中挥发性成分的差别,而且可知道两
者相同或相差的成分名称。
2.光谱法,选择某一波段波长,以此通过中药的粉末或提取液,测定
中药对这一波段波长的吸收并记录其吸收光谱,此为光谱鉴定中药的原理。
(1)紫外光谱(UV)鉴定法,该法是根据中药所含成分的不饱和程度有差
异,因而导致其紫外吸收曲线的形态、峰位、峰强度亦异而以此达到鉴别
的目的紫外光谱具有较高的灵敏度,因此,可用来检查中药制剂的纯度和杂
质的限量,是控制中药制剂质量的重要手段,利用杂质的特征吸收,可以很
灵敏的检测出微量杂质(10-5
g)的存在或控制主成分的纯度。多溶剂紫外光谱法:在使用紫外光谱
鉴定中药时发现,一些亲缘关系较近的药材,由于成分相差不大,用通常的
紫外光谱难以达到鉴别的目的,则可采用多溶剂紫外吸收,通过综合比较其
图谱的差异,亦可获得较好的鉴别效果。
(2)红外光谱法(IR)。红外光谱属于分子吸收光谱,在中药鉴别中具
有制样简单,实验快和图谱具有指纹性等优点,故应用较广。
(3)荧光光谱法(FP),中药所含的某些成分在紫外光照射下吸收一
定波长的能量后,又发射出比吸收光的波长更长的光即荧光,用荧光分析仪
记录在特定波长照射下各中药相同溶剂的提取液发射的荧光光谱,并比较
其区别,也可达到中药
鉴别的目的荧光法和薄层法相结合,即将中药提取液先经薄层展开,再
将薄层板置于365nm或254nm波长荧光下观察,比较其斑点荧光的颜色和
展开距离或将薄层板置于薄层扫描仪内,用适当的激发和发射波长进行扫
描,可以得到各中药的荧光扫描
图用于鉴别,这类方法对于一些含有能发射荧光成分的药材尤为适用。
(4)核磁共振法(NMR),类似于红外和紫外光谱,是另一种形式的吸
收光谱,在波长为10~100m的无线电频率区域的电磁波照射分子,可引起分
子中某种核的能级跃迁,使原子核从低能态跃迁到高能态,此即核磁共振。
由于中药中的组分太复杂,通常选用某一溶剂的特征提取物进行分析,获得
该中药的HNMR指纹图。
(5)质谱法(MS)。质谱是按照带电粒子(即离子)的质量对电荷的比
值大小依次排列形成的谱图,当中药提取液分子在质谱仪的离子源中以某
种方式电离后,所形成的正离子在高压电
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