石蜡切片的制作及HE染色课件.pptxVIP

石蜡切片的制作及HE染色件

?石蜡切片制作简介?石蜡切片制作过程?HE染色原理及步骤?石蜡切片HE染色结果分析?石蜡切片制作及HE染色注意事项目录contents

01石蜡切片制作介

石蜡切片将生物组织固定、脱水后，用石蜡包埋，经过切片机制成薄片，再进行染色等处理，最后制成可以在显微镜下观察的样本。

石蜡切片制作过程包括组织取材、固定、脱水、透明、浸蜡、包埋、切片和贴片等步骤。

石蜡切片的应用石蜡切片是病理学诊断和研究中最常用的技术之一，广泛应用于医学、生物学等领域。

02石蜡切片制作程

取材与固定取材选取适当的组织块，要求大小适中、有代表性。固定将组织块迅速放入固定液中，以防止组织自溶和腐败。

脱水与透明脱水将组织块中的水分逐渐脱去，以便于后续的浸蜡和包埋。透明使组织块变得透明，以便于后续的切片和观察。

浸蜡与包埋浸蜡将组织块放入熔化的石蜡中，使其被石蜡完全浸没。包埋将组织块用石蜡包埋，形成一整块石蜡块，以便于后续的切片。

切片与贴片切片将石蜡块切成薄片，要求厚度均匀、无裂痕。贴片将切好的薄片贴在载玻片上，以便于后续的染色和观察。

烤片与脱蜡烤片将贴好的载玻片放入烤箱中烤干，以便于固定薄片。脱蜡将薄片中的石蜡完全脱去，以便于后续的染色。

03HE染色原理及步

HE染色定义HE染色是一种常用的组织学染色方法，用于显示组织结构和细胞形态，以便病理医生进行疾病诊断。HE染色利用苏木精和伊红两种染料对组织进行染色，苏木精能够与细胞核中的DNA结合，使细胞核呈现蓝色；伊红能够与细胞质结合，使细胞质呈现红色。

HE染色原理01苏木精染料是一种碱性染料，能够与酸性物质结合，如DNA。当苏木精进入细胞核后，与DNA结合，使细胞核呈现蓝色。02伊红染料是一种酸性染料，能够与碱性物质结合，如蛋白质。当伊红进入细胞质后，与蛋白质结合，使细胞质呈现红色。

HE染色步骤脱蜡将石蜡切片放入二甲苯中脱蜡5-10分钟，然后使用无水乙醇冲洗两次，每次2分钟。水化封片将染色后的切片用中性树胶封片，并放在显微镜下观察。将脱蜡后的切片放入水中，使组织完全水化。伊红染色苏木精染色将切片放入伊红染液中染色5分钟，然后将切片放入苏木精染液中染色5-10分钟，然后使用盐酸酒精分化液分化，再用自来水冲洗。使用自来水冲洗。

04石蜡切片HE染色果分析

染色效果评价染色效果评价背景染色控制对石蜡切片进行HE染色后，观察染色是否均匀，细胞核和细胞质是否清晰可辨，以及背景染色是否适度。背景染色应保持适度，避免出现过多的杂质干扰细胞的辨识。染色过深或过浅如果染色过深，细胞核可能会过于浓重；如果染色过浅，细胞核可能呈现淡蓝色，都不利于后续的观察和辨识。

细胞结构辨识细胞质细胞质染色后呈粉红色，其染色深浅和质地的细腻程度可以反映细胞的代谢活跃程度。细胞核细胞核是细胞最重要的组成部分之一，染色后呈深蓝色，是辨识细胞类型和状态的重要依据。细胞器某些细胞器在HE染色后可以显现出特殊的形态和颜色，如线粒体、内质网等，有助于对细胞进行更深入的结构辨识。

病理诊断依据肿瘤诊断炎症诊断鉴别良恶性肿瘤通过观察肿瘤组织在石蜡切片HE染色后的形态、染色深浅、细胞排列方式等特点，可以初步判断肿瘤的性质和类型。炎症细胞的种类和数量是炎症诊断的重要依据，如淋巴细胞、浆细胞和巨噬细胞等在HE染色后的形态和分布特点。良恶性肿瘤在石蜡切片HE染色后通常表现出不同的形态和染色特点，病理医生可以通过观察这些特点对肿瘤进行良恶性鉴别。

05石蜡切片制作及HE染色注意事

操作安全须知010203实验室安全个人防护废弃物处理确保实验室通风系统良好，避免有毒气体积累。穿戴实验服、化学防护眼镜、化学防护手套等。按照实验室规定正确处理废弃物。

试剂配制与保存试剂配制按照标准操作规程配制试剂，确保准确性和一致性。试剂保存试剂应存放在阴凉、干燥、避光的地方，避免交叉污染和挥发。

仪器设备使用与维护设备操作按照设备操作手册进行操作，避免因误操作导致设备损坏或安全事故。设备维护定期对设备进行维护和保养，确保设备正常运行和使用寿命。

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