鸡蛋清中提取溶菌酶.ppt

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关于鸡蛋清中提取溶菌酶溶菌酶溶菌酶(lysozyme)又称胞壁质酶(muramidase),由129个氨基酸组成的一种无毒、无副作用,又具有一定的溶菌作用碱性球蛋白,可溶于水和酸性溶液,而且耐热(pH4~7的范围内,在100℃处理1min仍有近100%的活力,但在碱性环境条件下,酶稳定性较差),耐干燥,在室温下可长期存放,性质稳定。溶菌酶存在于人体的各个组织中,如心、脏、脾、肺和肾等,其中以肾和肺中含量最高。鸟类和家禽的蛋清、哺乳动物的泪、唾液、血浆、尿、乳汁等体液以及微生物中也含此酶,其中以蛋清含量最为丰富。植物中有溶菌酶,目前已从木瓜、无花果、芜菁、大麦等植物中分离出溶菌酶,其分子量较大,约为24000~29100。第2页,共10页,星期六,2024年,5月溶菌酶的应用医药方面溶菌酶作为一种存在于人体正常体液及组织中的非特异性免疫因素,具有多种药理作用,它具有抗菌、抗病毒、抗肿瘤等功效,目前日本已生产出医用溶菌酶,其适应症为出血、血尿、血痰和鼻炎等。第3页,共10页,星期六,2024年,5月食品和发酵工业溶菌酶是一种无毒、无副作用的蛋白质,又具有一定的溶菌作用,因此可用作食品防腐剂。现已广泛应用于水产品、肉食品、蛋糕、清酒、料酒及饮料中的防腐;还可以添入乳粉中,使牛乳人乳化,以抑制肠道中腐败微生物的生存,同时直接或间接地促进肠道中双歧杆菌的增殖。此外,还能利用溶菌酶生产酵母浸膏和核酸类调味料等。第4页,共10页,星期六,2024年,5月细胞工程

溶菌酶具有破坏细菌细胞壁结构的功能,以此酶处理细菌可得到原生质体,因此,溶菌酶是基因工程、细胞工程中细胞融合操作必不可少的工具酶。第5页,共10页,星期六,2024年,5月鸡蛋清中提取溶茵酶材料原料:鸡蛋、NaOH、NaCl、丙酮仪器与设备:搅拌器(200-300r/min),离心机(4000r/min),抽滤机第6页,共10页,星期六,2024年,5月工艺流程原料→清洗→去蛋壳→分离蛋清→搅拌→过滤→加盐→调节pH值→结晶→干燥→成品→包装第7页,共10页,星期六,2024年,5月实验步骤选择新鲜鸡蛋,蛋清的pH值不能低于8.0,否则不能用。清洗:用水洗掉蛋壳表面的不洁之物。将鸡蛋的两端各敲一个小洞,使蛋清流出。用搅拌机搅拌,将蛋清搅拌稠度均匀即可,以不引起泡沫为宜,防止由于起泡引起蛋白质的泡沫变性,而影响溶菌酶活性及产率。过滤:用双层纱布将稠度均匀的蛋清过滤,滤除蛋清溶液中的脐带块及蛋壳等。加盐:按50:1的比例(NaCl:蛋清液),向蛋清液中加入NaCl细粉,边搅拌边加入促使NaCl细粉及时溶解,以避免NaCl沉于容器底部,而因局部浓度过高而产生大量的白色沉淀第8页,共10页,星期六,2024年,5月结晶:用1mod/l的NaOH溶液调节PH为9.5-10.0,边搅拌边加,避免过碱引起蛋白质变性。于4℃条件下静置过夜,至结晶析出。结晶过滤或分离:用滤纸或尼龙布过滤,或用离心机离心10min,得到溶菌酶结晶。结晶洗涤:用丙酮将溶菌酶结晶洗涤数次(一般3次即可)。干燥:将溶菌酶结晶在常温或(50-60)℃条件下干燥制成成品,水分含量质量分数约为(2-3)%。第9页,共10页,星期六,2024年,5月感谢大家观看第10页,共10页,星期六,2024年,5月

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