食品微生物检验常用的试剂及其配制.pptx

常用染色液的配制

目录/Contents1常用染色液的配制染色液

01常用染色液的配制1.吕氏碱性美蓝染色液美蓝0.3g95％乙醇30mL0.01％氢氧化钾溶液100mL将美蓝溶解于乙醇中，然后于氢氧化钾溶液混合。染色时，先将涂片在火焰上固定，待冷却后滴加染液，染1min~3min，水洗，待干，镜检。

01常用染色液的配制2.奥尔特氏荚膜染色液（1）成分沙黄3g蒸馏水100mL用乳钵研磨溶解。

01常用染色液的配制（2）染色法将涂片在火焰上固定，滴加染色液，并加热至产生蒸汽后，继续染3min，水洗，待干，镜检。（3）结果炭疽芽孢杆菌菌体呈赤褐色，荚膜呈黄色。

01常用染色液的配制3.瑞氏染色液（2015年新法）（1）成分瑞氏色素0.1g甲醇60mL用乳钵研磨溶解

01常用染色液的配制3.瑞氏染色液（2015年新法）（2）染色法①待涂片自然干燥后，滴加染色液，固定1min。②加入等量磷酸盐缓冲液，轻轻晃动玻片或采用其他方式混合，使磷酸盐缓冲液与瑞氏染液混匀静置；③再用蒸馏水从一端轻轻冲洗，待干燥后，镜检。

01常用染色液的配制4.革兰氏染色法（1）染色液①结晶紫染色液结晶紫1g95％乙醇20mL1％草酸铵水溶液80mL将结晶紫溶解于乙醇中，然后与草酸铵溶液混合。

01常用染色液的配制②革兰氏碘液碘1g碘化钾2g蒸馏水300mL将碘与碘化钾先进行混合，加入蒸馏水少许，充分振摇，待完全溶解后，在加蒸馏水至300mL。

01常用染色液的配制③沙黄复染法染色液沙黄0.25g95％乙醇10mL蒸馏水90mL将沙黄溶解于乙醇中，然后用蒸馏水稀释。

01常用染色液的配制（2）染色法①将涂片在火焰上固定，滴加结晶紫染色液，染1min，水洗；②滴加革兰氏碘液，作用1min，水洗；③滴加95％乙醇脱色，约30s；或将乙醇滴满整个涂片，立即倾去，再用乙醇滴满整个涂片，脱色10s；④水洗，滴加复染液，复染1min，水洗，待干，镜检。（3）结果革兰氏阳性菌呈紫色，革兰氏阴性菌呈红色。

01常用染色液的配制5.耐酸性染色法（1）染色液①石炭酸品红染色液碱性品红0.3g95％乙醇10mL5％苯酚水溶液90mL将品红溶解于乙醇中，然后与苯酚溶液混合。

01常用染色液的配制②3％盐酸-乙醇浓烟酸3mL95％乙醇97mL③复染液吕氏碱性美蓝染色液

01常用染色液的配制（2）染色法①将涂片在火焰上固定，滴加石炭酸品红染色液，徐徐加热至有蒸汽出现，但切不可使沸腾。染液因蒸发减少时，应随时添加。染5min，倾去染液，水洗；②滴加盐酸-乙醇脱色，直至无红色脱落为止，（所需时间视涂片厚薄而定，一般为1min~3min），水洗；③加吕氏碱性美蓝染色液，复染30min，水洗，待干，镜检。（3）结果耐酸性细菌呈红色，其他细菌、细胞等物质呈蓝色。

01常用染色液的配制6.柯氏染色法（1）染色液成分0.5％沙黄液0.5％孔雀绿液（2）染色法①将涂片在火焰上固定，滴加0.5％沙黄液，并加热至出现气泡，约2min~3min，水洗；②滴加0.5％孔雀绿液，复染40s~50s，水洗，待干，镜检。（3）结果布氏杆菌呈红色，其他细菌及细胞呈绿色。

01常用染色液的配制7.鞭毛染色法（1）染色液的配制①甲液称丹宁酸5g、氯化高铁（FeCl3）1.5g，溶于100mL蒸馏水中，待溶解后加入1％的氢氧化纳溶液1mL和15％的甲醛溶液2mL。

01常用染色液的配制7.鞭毛染色法②乙液称2g硝酸银溶于100mL蒸馏水中。在90mL乙液中滴加浓氢